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- JLCXB2147
- 国内
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存：
82
- 英文名：
Stbl2感受态细胞
菌株类型: E.coli
培养基: LB培养基
生长条件: 37 ℃, 有氧
基因型: Stbl2感受态细胞菌株基因型
抗性: nalidixic acid 萘啶酸
质粒转化条件: 42 ℃热激
应用: 克隆菌株
蓝白斑筛选: 不适用
Stbl2感受态细胞
菌株特点:
Stbl2感受态细胞是不稳定质粒DNA例如逆病毒质粒或者含有高度重复序列质粒的克隆扩增菌株。
大能够适用于>20kb质粒的扩增。
不含有ccdB抗性基因，不能用来扩增含ccdB基因的质粒。
Stbl2含有recA1重组酶缺陷，能够有效防止质粒和基因组的重组发生率。
Stbl2含有endA1限制性内切酶缺陷，能够有效提升质粒抽提的质量。
Stbl2感受态细胞的平板生长优条件是30 ℃，生长的优培养基是S.O.C.培养基。
Stbl2感受态细胞来源于JM109感受态细胞。
菌株内的mcrA基因突变和mcrBC-hsdRMS-mrr缺失，允许细胞克隆扩增含有甲基化序列的DNA质粒或者基因组。
Stbl2感受态细胞中包含有α互补序列的质粒，所以本宿主菌不能被用于蓝白斑筛选。
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文献和实验The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
一、材料与试剂 1. SOBor2xYT2. MES3. 足够80个管子的TFB（50 mL）/400转化DMSO4. 5 M NaCl 二、仪器 1. 离心机 三、步骤 1. 室温下在5 ml SOB或2×YT中接种菌并且培养过夜。2. 加过夜培养的菌到500 ml 的SOB或2×YT，其装在4L瓶中以最大限度的透气。加入36 ml 5 M 的NaCl，在30℃下培养。3. 大约3 h，OD600达到0.5。4. 离心细胞。取沉淀，吸取
野生型 E.coli 并不容易转化，这是由于细菌产生一种酶能迅速降解进入的外源 DNA 。经过多年的努力，科学家们发现了一种方法可以增加细胞吸收外源 DNA 的效率。那就是用化学方法处理细胞，使其改变膜对 DNA 的通透性。这种细胞就称为感受态细胞，即细胞处于能摄入核酸分子时的生理状态。这种方法已经成为基因工程的常规技术，它对于我们利用体外 DNA 重组技术来了解真核和原核生物的基因功能特别重要。细菌的转化有两种类型：一种是自然转化（ natural transformation
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