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- 2025年07月13日
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![SW 780 [SW-780, SW780]厂家](https://img1.dxycdn.com/2019/1107/069/3378231448263162348-14.png!wh200)
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上海研生
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52
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详见说明书
769-P以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
资源名称 769-P
种属 人肾细胞腺癌细胞
类型 器官：肾 疾病：肾透明细胞腺癌
形态 上皮细胞样
培养方法
培养基 RPMI-1640(GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。
生长特性 贴壁生长
详细说明
动物种别 人
性别 女
描述 这株细胞来源于原发性透明细胞腺癌。 细胞呈边界不清楚的球形，高核质比，有微
具体操作：
1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液：大鼠主动脉平滑肌细胞取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
运输和保存：
769-P视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
化苦参进口/国产Serca2/SERCA2 ATPase 肌浆/内质网钙ATP酶2体含量测定
HPLC≥98%纤维蛋白原(BFI)测定试盒<含IBS、定标血浆>5mgTIMP
AQP3Water, nuclease-free4x1.25 ml小鼠可溶性补体激活产物SC5b9 免疫试剂盒
黄芪苷进口/国产AP2 gamma 转录因子AP-2γ体含量测定
HPLC≥98%纤维蛋白原(BFI)测定试盒<含IBS、定标血浆>5mgMMP
APODWater, nuclease-free30 ml小鼠可溶性Toll样受体9(sTLR9/sCD289)免疫试剂盒
断血流皂苷A（醉鱼草皂苷 Ⅳb）进口/国产P45017A1/Cytochrome P450 17A1 细胞色C P450 17A1体TLC法含量测定 GC≥98%GTP酶NRas检测试盒20mgPIIINP
HPLC≥98%纤维蛋白原(BFI)测定试盒<含IBS、定标血浆>5mgHSC
Integrin Alpha3英文名称：SNAP25缩素复合物亚型蛋白3抗体
769-PBR，500u/mg95%500gPI
BR，5u/ul，99%98%200ua-enolase
TNRC6B英文名称：RASA1大肠杆菌耐热性肠毒素抗体
BR，500u/mg95%5gPC
MMP-1 质金属蛋白酶-1体进口/国产phospho-CK II beta(Ser209) 化丝/苏蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)体
Torsin A英文名称：phospho-RASA1 (Tyr460)泛素激活酶E1抗体
BR，99%98%100mgDHAR
MMP-2 质金属蛋白酶-2体进口/国产DUSP26/MKP8 双特异性蛋白酶26体（丝裂原活化蛋白激酶酶8）
phospho-Tau protein (Thr548)英文名称：RNF87表皮生长因子受体抗体
注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
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文献和实验山西省阳泉市疾病预防控制中心 潘盂泉 目前，一些V-P培养基的生产厂家提供的对实验结果判定说明是接种细菌于37℃培养24h，滴加V-P甲、乙液后在30min内观察结果，变红色为实验阳性，不变色为阴性。然而在实际工作中，笔者发现此方法会造成一些实验结果的误判，并不是所有的细菌都适用上述判定方法。 V-P实验常用于细菌检测，可检验细菌利用葡萄糖产生中性乙酰甲基甲醇的能力，在碱性环境下，乙酰甲基甲醇被空气中氧气氧化成二乙酰，二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含有的胍
（无）条带，如抗体无专一性则条带无变化举个例子，癌症免疫常用的 PD-L1 抗体，下图可看到 GTX104763 PD-L1 抗体，使用基因敲弱的细胞裂解液，WB 的条带会随之变弱，显示 GTX104763 抗体具有高特异性。GTX104763 还适合多种应用，包括 WB、ICC/IF、IHC-P（可达 1:1,000）、 IHC-Fr（可达 1:1,000），及多篇文献引用，为高敏、高特异性的可靠抗体工具。又如白血病标记物-CD44，CD44 参与介导细胞存活的迁移、增殖、分化和信号传导途径。GTX
疾病预防控制中心《全国艾滋病检测技术规范》（2009年修订版）]，如为下述情况可判为阴性：①在整条膜上未出现任何显色条带；②未出现与已知分子量病毒蛋白相应的条带。在进行Western Blot试验中，常见膜上出现与已知分子量HIV抗原无关的条带，这些条带的出现通常与HIV抗原中混有某些可与HIV抗体产生交叉反应的蛋白所致。这种交叉反应条带的出现，不同厂家生产的试剂盒或同一厂家不同批号的试剂盒均不相同。Western Blot试验的阳性判断标准为:①在抗-P24、抗gp41和抗gp160／120三条带中，出现至少两条
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