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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pUC18-CD274-T2A-EGFP质粒
- 库存:
41
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验相关专题 那些实验室常用的克隆载体 pUC18 和 pUC19质粒图谱 pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ,是最常用的质粒载体,其结构组成紧凑,几乎不含多余的 DNA 片段,GenBank注册号为 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而来,其中 lacZ (MSC)来自 M13mp18/19 图 3-4 是其质粒图谱 。 这两个质粒的结构几乎是完全
基因连接到载体上,需经过一系列酶促反应,涉及几种工具酶,其中最为重要的是两大类酶: ① 限制性内切酶:把载体DNA切开形成平端或粘末端。 ② DNA连接酶:用于连接载体和外源DNA片段。 pUC18/19是常用的质粒载体,其图谱如右所示: pUC18/19的多克隆位点如下所示: 三、实验仪器 离心机移液器16套(每2人1套)
1实验原理 DNA重组分子在体外构建完成后,必须导入特定的受体细胞,使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状,这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化。对于不同的受体细胞,往往采取不同的转化战略。1.1 DNA重组分子的常用转化方法 1.1.1 Ca 2 诱导转化1970年Mandel和Higa发现用CaCl2处理过的大肠杆菌能够吸收l噬菌体DNA,此后不久,Cohen等人用此法实现了质粒DNA转化大肠杆菌的感受态细胞,其整个操作程序为:1)将处于对数生长期的细菌置入0℃
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