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-20℃&-80℃
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3个月~12个月
- 英文名:
pXC17.4质粒
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41
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验(尤其质粒较大时) : 洗脱溶解质粒时,可适当加温或延长溶解时间。 16. 乙醇残留: 漂洗液洗涤后应离心尽量去除残留液体,再加入洗脱缓冲液。 17. 洗脱液加入位置不正确: 洗脱液应加在硅胶膜中心部位以确保洗脱液会完全覆盖硅胶膜的表面达到最大洗脱效率。 18. 洗脱液不合适: DNA 只在低盐溶液中才能被洗脱,如洗脱缓冲液 EB(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH8.5)或水。洗脱效率还取决于 pH 值,最大洗脱效率在pH 7.0-8.5 间。当用水洗脱时确保其 pH
型信息可以判断目的质粒是否可以使用这个感受态细胞来进行扩增,以及是否可以进行目的实验。例如 DH5α基因型:F-, φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA, supE44 , λ-, thi-1, gyrA96 , relA1。基因型信息中有 lacZΔM15,说明其表达产物可以与 PUC 质粒编码表达的β-半乳糖苷酶的α肽段实现α互补,因此可以选择用 DH5α感受态来扩增
自杀性质粒载体:一般用于基因突变。将突变的目的基因克隆到自杀性质粒载体上,通过接合等使其进入宿主,由于在宿主菌中不存在复制基因启始所需的复制蛋白(如Pi蛋白等),其无法复制,在外界选择性压力的作用下,自杀性质粒载体所携带的突变基因就与宿主染色体上的野生型发生基因发生二次同源重组,产生了带有突变的突变株;而质粒载体自身由于自杀性特性连同染色体上原有的野生型基因一起随着细菌的传代从菌体内消失。至于一次重组的突变株,可借助质粒上的某些选择基因(如sacB,sucrose敏感)筛除。整合载体:将目的
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