pCDNA3.1-Gcgr-m小鼠基因质粒

一种优化的PCR 方法——降落PCR 扩增目的基因

温度越来越低[2 ] ,从而达到最佳扩增条件的方法。我们在构建人 CD137 - hIgG1Fc - pCDNA3 融合蛋白真核表达载体以及在检测HBV DNA 多聚酶基因突变的过程中运用降落PCR 进行了扩增目的基因的尝试。1 　材料和方法1.1 　质粒含有人CD137 全长cDNA 序列的pCDNA3 质粒(CD137 - pCDNA3) ,由Herbert Schwarz 教授惠赠; 含hIgG1 FccDNA的PGEM - T质粒由第二军医大学曹雪涛教授惠赠; HBV DNA ,从6 位慢性HBV 感染者血清

核基质结合区修饰的附着体载体介导的EGFP基因体外表达

-MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶；小牛血清；G418；DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter；含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2，获得长4.7 kb的EBVR，包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP，克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill

【共享】题录集：静脉大容量快速注射siRNA或质粒

肝脏组织中表达人甘露糖结合凝集素（mannose-binding lectin，MBL）。方法：采用PCR方法从pGEMT-MBL质粒中扩增人MBLcDNA序列，克隆人pUC19载体中，限制性酶切鉴定及测序正确后，将MBLcDNA克隆人真核表达载体pcDNA3质粒中，构建成pcDNA3-MBL质粒，经尾静脉大容量快速注射pcDNA3-MBL质粒20μg，8h后处死小鼠，Western Blot方法检测小鼠肝脏组织和血清中人MBL，免疫组织化学方法检测小鼠肝脏组织中人MBL的表达情况。结果：成功扩增出