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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 库存:
大量
- 英文名:
Hotstart AB DNA Polymerase
- 规格:
4×250 units
产品说明:
本制品是一款采用抗体修饰技术的重组Taq DNA 聚合酶,适用于Hot Start PCR。常温下,Taq DNA聚合酶的活性被抗体封闭,从而抑制常温条件下由引物的非特异退火或引物二聚体引起的非特异扩增。当扩增反应体系被加热到95℃热激2 min时,聚合酶活性因Taq酶抗体变性得到恢复,因此无需特殊失活处理,在常规PCR反应条件下即可使用。
■ 产品组成:
| 产品名称 | 包装规格 | |
| YB2104C | YB2104C | |
| Hotstart AB Taq DNA polymerase (5 U/μl) |
50 μl | 4×50 μl |
| 5× PCR Buffer | 1 ml | 4×1 ml |
| Tris-HCl(pH8.0) | 20 mM |
| KCl | 100 mM |
| EDTA | 0.1 mM |
| DTT | 1 |
| Tween 20 | 0.5% |
| Nonidet P-40 | 0.5% |
| Glycerol | 50% |
-20℃长期保存,保质期2年
■ 用途:
常规PCR、热启动PCR、qPCR、基因组PCR、TA克隆、引物延伸、DNA标记
■ 活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74 ℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
■ PCR产物末端形状:
使用本制品扩增得到的大部分PCR产物3‘端附有一个“A”碱基,因此可直接克隆于T-vector。
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文献和实验非特异性扩增的概率降到最低,想出了这种只有在高温下经过一定的时间才能激活并释放活性的酶—热启动酶。 热启动酶多用两种修饰方式:化学修饰和抗体修饰。 例如: Vazyme 的 ChamQTM QPCR Master Mix 中的 Champagne TaqTM DNA Polymerase 是经过抗体修饰的 Taq DNA Polymerase,95 ℃ 加热 30 sec 就可以灭活抗体激发酶活。AceQ® QPCR Master Mix 中 AceTaq®DNA Polymerase 是经过化学
哦~模板的上样量若直接使用 cDNA 原液作为模板,建议使用体积不超过 qPCR 反应总体积的 1/10!当复孔之间重复性不佳时,可将模板做适当稀释后以大体积加入反应体系,可有效提高实验重复性。看小 V 做的实验,是不是重复性爆表啊~~~预变性时间常见的 qPCR 试剂预变性时间从 30 sec - 15 min 不等。科学家们为了封闭常温下酶的活性,使 qPCR 产生非特异性扩增的概率降到最低,想出了这种只有在高温下经过一定的时间才能激活并释放活性的酶—热启动酶。热启动酶多用两种修饰方式:化学
一、基因组DNA的提取 此步重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者。 使用两者的细节:1. 蛋白酶K可以使用灭菌双蒸水配制成20 mg/ml; 2. RNA酶必须要配制成不含DNA酶的RNA酶,即在购买市售RNA酶后进行再处理,配制成10 mg/ml。否则可能的后果是不仅没有RNA,连DNA也被消化了。两者均于-20℃保存。3. 验证提取DNA的纯度的方法有二: (1)紫外分光光度计计算OD比值
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