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- YS-C3600
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- 2025年07月12日
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上海研生
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43
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详见说明书
PG-BE1以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
资源名称 PG-BE1
种属 人肺巨细胞癌高转移细胞株
形态 上皮样
培养方法
培养基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法 1:6传代；2~3天1次。
生长特性 贴壁生长
存储条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
详细说明
传代情况 C3
支原体检测 培养法（-）
使用权限 A类
描述 母系人肺巨细胞癌PG，单细胞克隆法分离鉴定得到的高转移细胞株；裸鼠体内成瘤率100%，肺转移率88%，淋巴转移率94%。
具体操作：
1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液：大鼠主动脉平滑肌细胞取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
运输和保存：
PG-BE1视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
9004-54-0高端化学试窖蛋白2(CAV2)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
枣仁皂苷B进口/国产MAPK organizer 1/Morg1 丝裂原活化蛋白激酶组织蛋白1体含量测定
ARSA英文名称：AMBRA1小鼠百日咳病毒IgG抗体免疫试剂盒
9004-54-0高端化学试窖蛋白3(CAV3)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
牛磺胆钠进口/国产PNPLA6/NTE 含patatin样脂酶6体鉴别
ACA11英文名称：Phospho-ATG4C(Ser177)小鼠百白破抗体免疫试剂盒
9004-54-0高端化学试钙蛋白酶3(CAPN3)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
牛磺熊去胆进口/国产OTC 鸟酰转移酶体含量测定
AHA3英文名称：Phospho-ATG4C(Ser398)小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)免疫试剂盒
PG-BE198%100TGABA
Dihydrotachysterol进口、国产67-96-930mg×4amplues
ADH/AVP peptide英文名称：DR4/APO2/TRAILR1 (Death receptor 4)组蛋白H3 K9基转移酶抗体
99%100TPAL
Dihydroxyacetone进口、国产96-26-4250mg BR，类型VI，0.2u/mg98%100mgECHY
CCDC94英文名称：C19orf51人可溶性胸苷激酶1(TK1)免疫试剂盒
99%100TMDA
BR，类型VI，0.2u/mg98%250mgAmy
CCDC82英文名称：C19orf52人可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)免疫试剂盒
注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
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文献和实验干货 | CUT and Tag 核心酶 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase 大解密
比高、实验周期短（ 1 天实现从细胞到文库构建）、可重复性好等显著优势，尤其适用于早期胚胎发育、干细胞、肿瘤以及表观遗传学等研究领域。 图 1. CUT&Tag 原理图 由于 CUT&Tag 主要是针对极低细胞起始量进行实验，因此对核心酶原料有着极高的要求。CUT&Tag 技术的核心原料酶是 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase ，它具有高活性，对微量 DNA 有高灵敏度和高亲和力，能有效抓取数十个细胞中的有限结合位点等特点
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