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- 上海研生
- YS-C3599
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- 2025年07月03日
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上海研生
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42
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详见说明书
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
资源名称 PG-LH7说明书
种属 人肺巨细胞癌低转移细胞株
形态 上皮样
培养方法
培养基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法 1:3传代；2~3天1次。
生长特性 贴壁生长
存储条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
详细说明
传代情况 P6
支原体检测 培养法（-）
STR AmelogeninX；CSF1PO12，13；D13S31712；D16S53913；D18S5114；D19S43313，15.2；D21S1129；D2S133818；D3S135816，17；D5S81ﾐᣪ㲸‚
细胞培养的优点：
1.PG-LH7说明书研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
收到PG-LH7说明书如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
阿托伐他汀钙进口/国产PMCA 细胞膜钙转运ATP酶体含量测定
80%DNA损伤诱导转录因子4样蛋白检测试盒20mgNitrite
ANTXR2英文名称：ADCY2小鼠半乳糖凝集素-3(Gal-3)免疫试剂盒
己可可进口/国产GABRA3/GABA A Receptor alpha 3 G受体α3体含量测定 9004-54-0高端化学试环前列受体(PTGIR)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
对照药材DNA转移酶3A检测试盒1gcyclin D-cdk4
ATG4C英文名称：APOC3小鼠半乳糖6硫酯酶(Gal-6S)免疫试剂盒
9004-54-0高端化学试盖膜蛋白β(TECTβ)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
GC≥98%DNA转移酶1检测试盒20mgHBV Casset
APG5L英文名称：Apolipoprotein E4小鼠半胱氨蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)免疫试剂盒
PG-LH7说明书98%100Tα-KGDHC
17alpha-Dihydroequilin进口、国产651-55-850mg
UACA英文名称：DMBT1 (Deleted in malignant brain tumor 1)磷化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体
97%100Tβ-1,3-GA
Dihydroergotamine Mesylate进口、国产6190-39-2500mg
YFV Envelope glycoprotein英文名称：DNA-PKcs peptide基尔曼氏细小病毒VP1/VP2抗体(大鼠潜在病毒KRV)C端
98%100Tβ-GUS
Dihydrostreptomycin Sulfate进口、国产5490-27-7200mg
2,4-D/BSA英文名称：DPPA2 (developmental pluripotency associated gene2)钾离子通道蛋白家族KCNQ1抗体
公司优势：
1.具有多年的销售经验和资深的行业背景，我司秉承质量优先的理念，重视自主创新，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；
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文献和实验干货 | CUT and Tag 让 ChIP-Seq更简单高效！
说明书推荐的反应体系进行 CUT&Tag 实验；其中，pG-Tn5 转座子使用的终浓度为 0.04μM ，一抗为 H3K27me3（CST，#9733），二抗为 Goat anti Rabbit（Bioworld，#BS13271）。 A、文库峰型检测 使用 Agilent 2100 Bioanalyzer 进行文库分布检测。 图 2. 使用 TD901 构建 100 cells CUT&Tag 文库峰型图 图 3. 使用 TD901 构建 10,000 cells CUT&Tag
按照TaKaRa的说明书，我用了Cool Start法，就是所有操作和试剂都是放在冰上进行的，据说能够减少非特异性。我当时担心目的基因量不够，所以P了两管，分到四个孔跑胶回收的。胶回收用的是OMEGA的试剂盒。 切胶回收之后测得目的片段浓度大概为20 ng/ul。按照TaKaRa的pMD18T说明书的要求，pMD18T需要加入1 ul，而目的片段需要0.1 pmol-0.3 pmol，换算一下，需要的目的片段的量大概为0.1*1800*325=58500 pg=58.5 ng到0.3*1800
人胃蛋白酶原（PG ） 酶联免疫分析（ ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中 胃蛋白酶原（PG ） 的 含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 胃蛋白酶原（ PG ） 水平。用纯化的人 胃蛋白酶原（ PG ） 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 胃蛋白酶原（ PG ）， 再与 HRP 标记的 胃蛋白
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
