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- 上海研生
- YS-C3880
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- 2025年07月14日
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上海研生
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35
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详见说明书
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
资源名称 ACSuR
种属 人源性肾透明细胞癌细胞舒尼替尼耐药株
形态 上皮样
培养方法
培养基 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS
生长特性 贴壁生长
详细说明
描述 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。
传代情况 PN5
支原体检测 阴性
细胞培养的优点：
1.ACSuR研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
收到ACSuR如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
GC≥98%EB病核原3A体检测试盒100mgMOG HPLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试盒ISI1.0-1.2<含复溶液>5mgADAMTS-13Ab
英文名称对照品猪血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA Kit，48T/96T 200mg
BRD8英文名称：Annexin V兔子皮质醇(Cortisol)免疫试剂盒
HPLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试盒ISI1.2-1.4<含复溶液>5mgLeucine
英文名称标准品大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA Kit，48T/96T 25mg
phospho-Bik(Thr33)英文名称：Annexin V兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫试剂盒
HPLC≥98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试盒<鞣花含Cacl2>5mgIle
HPLC≥98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试盒<鞣花含Cacl2>5mgCPP65 Ag
BAP135英文名称：alpha Adaptin兔子黏多糖/糖胺聚糖免疫试剂盒
ACSuRBR，2500～7000u/mg，牛血>98.0%(GC)15KUt-Pro
Neurofascin英文名称：LYL1猫眼综合征染色体候选因1体
CGK2英文名称：CCDC25人凝血酶(Thrombin)免疫试剂盒
BR，2500～7000u/mg，猪血>98.0%(GC)20mgOR4A1
NKA 神经激肽A体进口/国产CCDC63 卷曲螺旋结构域蛋白63体
CGNL1英文名称：CCDC28A人凝溶胶蛋白(Gelsolin)免疫试剂盒
MIF 巨噬细胞移动抑制因子体进口/国产phospho-FRS2(Tyr436) 化成纤维细胞生长因子受体底物2体
NKB 神经激肽B体进口/国产CCDC8 卷曲螺旋结构域蛋白8体
CGREF1英文名称：CCDC28B人凝聚素(CLU)免疫试剂盒
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