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- 2025年10月24日
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- 文献和实验
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- 保存条件：
-20℃/-80℃
- 保质期：
3个月/12个月以上
- 英文名：
JM109
- 库存：
14
- 供应商：
上海禾午生物科技有限公司
- 规格：
300μl
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文献和实验【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择！（接原原核表达研究者关心的10个问题贴）
性不利，容易出现质粒丢失、表达水平不稳定、菌株退化乃至发生污染等情况。 我们建议： 1、长期存放菌株和pET重组子应该存在甘油－70℃保种。但是要注意高浓度甘油(>10%)会导致质粒不稳定。请尽量保持甘油浓度8％。（15%浓度的甘油保种液和新鲜菌液1:1就行）2、重组质粒不宜长期保存于表达菌株（带DE3的大肠杆菌）中，请尽量使用带有recA endA突变的克隆菌株（比如C600，DH5a）进行质粒抽提和保存质粒。表达型的菌株提质粒经常会有质量不高或者背景的问题。特别是大量抽提。
, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.... 液氮或低温冰箱中取出的 大肠杆菌 *E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升 锥形瓶 的SOC培养基. 培养基 量不可再多,会影响效率.在18度 150
能力的质粒，由这种质粒转化的大肠杆菌形成白色菌落。 抗生素平板选择标记： ppUC19质粒带有氨苄青霉素抗性基因，而JM109宿主菌对氨苄青霉素没有抗性。在用pUC19质粒转化JM109后，涂布到含有氨苄青霉素的培养基上培养，没有被转化的菌不能生长，而被转化了的菌可以正常生长，形成菌落。 β-半乳糖苷酶系统筛选(蓝、白斑筛选)： pUC19质粒带有一个大肠杆菌DNA的短区段, 其中含有β-半乳糖苷酶基因(Lac Z)的调控序列和头
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