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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海研生
- 库存:
51
- 英文名:
详见说明书
资源名称 HLCL9C3
种属 人类淋巴母细胞瘤细胞
形态 淋巴母细胞样
培养方法
培养基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生长特性 悬浮生长
详细说明
描述 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
传代情况 C8
支原体检测 阴性
运输和保存:
HLCL9C3视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
培养细胞冻存方案:
HLCL9C3以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
泛钠进口/国产Snf1lk/SIK1 丝/苏蛋白激酶SIK1体含量测定
9004-54-0高端化学试氧桥二十烷受体1(OXER1)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
AKR1A1SmaI5x1200 units猪促生长激素释放激素(GHRH)免疫试剂盒
格列进口/国产CAMKK2 钙调蛋白激酶激酶β体含量测定
利铂进口/国产SGK3 丝/苏蛋白激酶Sgk3体HPLC法含量测定
ALADSmaI, HC6000 units猪促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒
格列嗪进口/国产IMPDH1 肌苷单脱酶1体含量测定
地平进口/国产BAZ/ACF1 区结构域相邻锌指蛋白1A体UV法含量测定
ALS2CR4SmaI2000 units猪促卵泡素(FSH)免疫试剂盒
HLCL9C3进口/国产英文名称:CARD15间变性淋巴瘤激酶核相互作用伴侣蛋白体
高端化学,合成试, 氧钒
CYP2E1英文名称:CK II Alpha人磷化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)免疫试剂盒
进口/国产英文名称:CLLD6化间变性淋巴瘤激酶核相互作用伴侣蛋白体
高端化学,固相合成, 2-[(2-己)氧]-
CXCL13/BCA1英文名称:CTNNA1人磷化肌球蛋白轻链(PMLC)免疫试剂盒
进口/国产英文名称:C13orf38核仁和纺锤体相关蛋白1体
高端化学,合成试, 3,5-二磺酰胺
Cdc23英文名称:CNTROB人磷化蛋白激酶C(P-PKC)免疫试剂盒
具体操作:
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:大鼠主动脉平滑肌细胞取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
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文献和实验um,不能有效的去除支原体的污染。热灭活可以去除支原体的污染。但是现在血清制备中的终端滤膜的孔径为0.1um甚至小到0.04um,所以血清中一般没有支原体的污染。 综合上面的观点,除非有特别的情况,标准厂家生产的胎牛血清一般不需要加热灭活。 需要说明的是,有些厂家生产的胎牛血清质量并不符合标准。笔者曾购买过国内一厂家的胎牛血清,没有灭活时细胞生长状态明显变差。所以如果您的胎牛血清来自一家可信度不高的厂家,那么为了安全起见,还是以加热灭活为好。 培养液中一定要加抗生素 随着超净台技术的提高,和超净
洗脱液,接着按照3.2b进行)2a.加入2ulRNaseA(0.5mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。DNA采用PCR纯化试剂盒中厂家说明进行纯化。样品冻存于-20°C.样品之所以加入RnaseA是因为高浓度RNA会在使用PCR纯化试剂盒时干扰DNA的纯化。而纯化柱子的饱和度是既定的。2b.加入5ul蛋白酶K(20mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。采用酚/氯仿抽提的DNA使用乙醇沉淀于10ul的糖原(5mg/ml).中。100ul水重悬浮。样品
变态反应)不同,类过敏反应不需要IgE介导的二次致敏,可以由外源性致敏物质直接诱发,且类过敏反应发生与否跟致敏物质的量有直接的关系。在类过敏反应中,外源性物质首先激活肥大细胞——肥大细胞脱颗粒,肥大细胞激活后会释放出组胺、类胰蛋白酶、C3、白三烯等活性产物,进而诱发下游的过敏反应。类胰蛋白酶是肥大细胞激活后释放的代表性物质之一,类胰蛋白酶的水平可以检测反应肥大细胞是否被集火。经过深入研究,我们建立了一种用斑马鱼体内快速类过敏反应的方法。 具体方法阐述如下: N-苯甲酰-DL-精氨酸对硝
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