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- 2025年12月30日
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- 文献和实验
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上海研生
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36
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详见说明书
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
资源名称 BT474说明书
种属 人乳腺癌细胞
形态 上皮细胞样
培养方法
培养基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生长特性 贴壁生长
详细说明
描述 该细胞由华中科技大学生命科学学院苏莉教授提交保藏，可用于相关的基础研究。
传代情况 C84
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
使用权限 A类
细胞培养的优点：
1.BT474说明书研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
收到BT474说明书如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
9007-34-5高端化学试外核苷焦酶/二酯酶6(ENPP6)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
乌美司进口/国产IFNA16/Interferon alpha 16 干扰α16体含量测定
Annexin A9pUC19 DNA/MspI (HpaII) Marker5x50 µg小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)免疫试剂盒
9007-34-5高端化学试脂肪酶K(LIPK)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
阿达进口/国产NET1 去上转运蛋白/神经递质去上转运体体含量测定 472-61-7高端化学试7-脱胆固还原酶(DHCR7)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
ADAMTS15pUC19 DNA/MspI (HpaII) Marker, ready-to-use50 µg小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)免疫试剂盒
9007-34-5高端化学试脂肪酶N(LIPN)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
472-61-7高端化学试酰化酶1(ACY1)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
ADAMTS2Lambda Mix Marker5x50 µg小鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫试剂盒
BT474说明书进口/国产英文名称：Parvalbumin致盲因LCA5蛋白体
98%100TPGAM1
C6orf191英文名称：Classical swine fever virus人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)免疫试剂盒
ZNF532英文名称：TRIM35化叉蛋白3A体
98%200TCPT
C6orf195 英文名称：CP110人活化蛋白C(APC)免疫试剂盒
ZNF516英文名称：TMEM16C化叉蛋白家族1体
97%100TAAT
SERPINB10英文名称：TRPV6G蛋白偶联受体31抗体
公司优势：
1.具有多年的销售经验和资深的行业背景，我司秉承质量优先的理念，重视自主创新，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；
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文献和实验人 Neuritin 酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本 中Neuritin 的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 Neuritin 水平。用纯化的 Neuritin 抗体 包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入 Neuritin ，再与 HRP 标记的 Neuritin 抗体结合，形成抗体
「癌细胞」：是我杀了我？PNAS 这项研究竟让肿瘤自己杀死自己
细胞表面的标记物 HER2。采用基于三聚体单链可变抗体片段（scFv）的可逆屏蔽，使病毒粒子从肝脏脱靶，并保护其免受免疫机制的清除。 研究人员利用这些成分设计了 SHielded, REtargeted ADenovirus（SHREAD） 基因治疗平台。使用临床批准的抗 HER 抗体 trastuzumab（TZB）作为模型单抗，在非复制腺病毒基因组中编码 TZB。随后用全长 IgG1 TZB（Ad-TZB）转导 BT474 细胞，纯化抗体进行 ESI-MS 分析发现与临床重组 TZB（Herceptin
药品情报重要来源之一，也是医师、药师、护师和病人治疗用药时的科学依据，还是药品生产、供应部门向医药卫生人员和人民群众宣传介绍药品特性、指导合理用药和普及医药知识的主要媒介。我国对药品说明书规定包括：药品名称、结构式及分子式（制剂应当附主要成分）、作用与用途、用法与用量（毒剧药品应有极量）、毒副作用、禁忌症、注意事项、包装（规格、含量）、贮藏、有效期、生产企业、批准文号、注册商标等项内容。
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