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NCI-N87[N87]供应商
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NCI-N87[N87]
贴壁生长
上海研生
28
YS-C3298
公司优势:1.具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;2.公司不仅与各大高校、科研机构以及性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。资源名称 NCI-N87[N87]供应商种属 人胃癌细胞形态 上皮样培养方法培养基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS生长特性 贴壁生长详细说明描述 NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72,并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体。它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc,L-myc,myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B2RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达:N-myc,L-细胞。细胞培养的优点:1.NCI-N87[N87]供应商研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。培养操作:1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.27814-48-8高端化学试矢车菊苷β6(CENTβ6)检测试盒(酶免疫吸附试验法)68-26-8高端化学试蛛受体2(LPHN2)检测试盒(酶免疫吸附试验法)C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun:active protein 1)英文名称:GLUT4(Glucose transporter type 4)磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体27814-48-8高端化学试白介1θ(IL1θ)检测试盒(酶免疫吸附试验法)68-26-8高端化学试生长抑受体1(SSTR1)检测试盒(酶免疫吸附试验法)cyclin D1英文名称:GIP (Gastric Inhibitory polypeptide)磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体29702-43-0高端化学试纹蛋白3(STRN3)检测试盒(酶免疫吸附试验法)68-26-8高端化学试突触(SYP)检测试盒(酶免疫吸附试验法)Beta-casein( Beta-casein)英文名称:ANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2)磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗体NCI-N87[N87]供应商C2orf24英文名称:BRWD3人血管紧张Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫试盒 ZNF473英文名称:TRAP1FAM96B蛋白体≥97%100THB-βPhospho-Stathmin(Ser38)英文名称:TRPM6生长分化因子6抗体ZFAND5英文名称:TEM8胚胎锌指样蛋白1体99%100TNotch-2S6PDH英文名称:TMEM2L鸟嘌呤核苷酸交换因子GEFT抗体 C3ORF31 英文名称:BRN4人血小板生长因子(PGF)免疫试剂盒ZNF146英文名称:TSPAN15FAM29蛋白体99%100TCOL5A2C3orf32英文名称:Bile salt-activated lipase人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)免疫试剂盒收到NCI-N87[N87]供应商如何处理?1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
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