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- 上海研生
- YS-C3252
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- 2025年12月28日
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上海研生
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23
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详见说明书
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
资源名称 Walker256
种属 大鼠肝癌细胞
提供形式 P1-2代冻存管
培养方法
培养基 90%DMEM+10%FBS
生长条件 95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度
生长特性 贴壁细胞
存储条件 50% DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
详细说明
细胞培养的优点：
1.Walker256研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
收到Walker256如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
207300-70-7高端化学试LIM半胱丰富域蛋白1(LMCD1)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
可进口/国产phospho-LSP1 (Ser204) 化白细胞F肌动蛋白结合蛋白体检查（TLC）
HCV-NS1英文名称：ZNF474高尔基体膜相关蛋白6抗体
阿伏宗标准品 CAS: 70356-09-1 Avobenzone 进口、国产 500mg
贝那替嗪进口/国产AEBP1 脂肪细胞增强结合蛋白1检查
HCV-NS3英文名称：ZBED4高尔基体自身蛋白GM130抗体
金硫葡糖标准品 CAS: 12192-57-3 Aurothioglucose 进口、国产 100mg
安他进口/国产CARD11 凋亡加强结构域蛋白11体含量测定
HCV-NS4a英文名称：ZW10 peptide糖代谢相关蛋白1抗体
Walker256英文名称小鼠表皮生长因子(EGF)ELISA Kit，48T/96T 250mg
进口/国产英文名称：phospho-c-Abl (Tyr412)微小染色体维持缺陷蛋白7体
phospho-Tau protein(Ser199)英文名称：RGS19表皮生长因子样激素受体1抗体 C22orf43 英文名称：BZW1人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)免疫试剂盒
英文名称猪表皮生长因子(EGF)ELISA Kit，48T/96T 200mg
进口/国产英文名称：phospho-c-Abl (Tyr226)单核细胞趋化蛋白2体(小鼠)
C2CD3英文名称：BMPR1B人血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)免疫试剂盒
英文名称黄豆黄甙大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA Kit，48T/96T 200mg
进口/国产英文名称：phospho-c-Abl (Tyr185)单核细胞趋化蛋白3体
Caspase 14英文名称：BNIP1人血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)免疫试剂盒
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1.具有多年的销售经验和资深的行业背景，我司秉承质量优先的理念，重视自主创新，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；
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文献和实验Role of Rho, Rac, and Rho-kinase in phosphorylation of myosin light chain, development of polarity, and spontaneous migration of Walker 256 carcinosarcoma cells.As previously shown, constitutive activation of the small GTPase Rho and its downstream
The Nitroreductase/CB1954 Enzyme-Prodrug System
by screening a panel of aziridines for cytotoxicity against the rat Walker 256 carcinoma. It is highly selective and effective against Walker tumor cells in vivo and in vitro with a therapeutic index of 70 (2 ). Based on the efficacy against the Walker
A Rat Pain Model of Facial Cancer
of cancer pain of the trigeminal nerve area. In this chapter, we describe in detail the generation of a facial cancer pain model of rats by inoculation of Walker carcinosarcoma 256B cells.
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