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- 2025年12月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Cell Meter™ Fluorimetric Intracellular Total ROS Activity Assay Kit*Red Fluorescence*
- 规格：
200 Tests
Cell Meter™ 荧光法细胞内总活性氧活性检测KitRed 荧光*
英文名: Cell Meter™ Fluorimetric Intracellular Total ROS Activity Assay Kit*Red Fluorescence*
活性氧（ros）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号转导中起着重要作用。然而，在氧化应激相关的状态下，ROS水平可以显著增加。ros的积累导致细胞结构的显著损伤。氧化应激在心血管疾病、糖尿病、骨质疏松、中风、炎症性疾病、许多神经退行性疾病和癌症中的作用已经确立。ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节不同的细胞内途径。Amplite™荧光活性氧检测试剂盒使用我们独特的活性氧传感器来量化活细胞中的活性氧。Amplite™活性氧红具有细胞渗透性。它与活性氧反应时产生红色荧光。试剂盒是一种优化的“混合读取”分析格式Amplite™荧光活性氧检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光检测方法，用于在1-2小时培养的活细胞中检测细胞内活性氧。该分析可在方便的96孔或384孔微量滴定板格式中进行，并且不需要分离步骤就容易适应自动化它的信号可以很容易地读取使用荧光微板阅读器或荧光显微镜。它既可以用来定量活性氧的活性，也可以用来筛选活性氧抑制剂。
- Prepare cells in growth medium
- Add Amplite™ ROS Red working solution (100 µL/well for a 96-well plate or 25 µL/well for a 384-well plate)
- Stain the cells at 37°C for 60 minutes
- Treat the cells with test compounds to induce ROS
- Monitor the fluorescence increase (bottom read mode) at Ex/Em= 520/605 nm (Cutoff = 590 nm) or fluorescence microscope with Ex/Em = 520/605 nm filter set
| Instrument: | Fluorescence microplate reader |
| Excitation: | 520 nm |
| Emission: | 605 nm |
| Cutoff: | 590 nm |
| Recommended plate: | Black wall/clear bottom |
| Instrument specification(s): | Bottom read mode |
| Instrument: | Fluorescence microscope |
| Excitation: | 520 nm |
| Emission: | 605 nm |
| Recommended plate: | Black wall/clear bottom |
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文献和实验探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。活性氧检测试剂盒[9]。荧光法检测线粒体产生和释放的反应性氧化物（ROS）[10]。羟基自由基的检测（二羟苄胺DHBAs和水杨酸盐Salicylate）[11] ROS was evaluated by the staining of 2’，7’- dichlorofluorescein diacetate（二氯荧光乙酰乙酸盐）.ROS production
Nat Nanotechnol：T 细胞免疫活性的可视化调控研究进展
刺激等，而肿瘤微环境中的活性氧 ROS 可以氧化 T 细胞膜表面的巯基-SH，使其变为双硫键 S-S，是介导 T 细胞免疫失活的重要机制之一（图 1）。瑞典 Gelderman 等人的研究发现：T 细胞的免疫活性与其膜表面还原性蛋白（例如 Trx）的自由巯基（-SH，还原态）数量成正比，而与双硫键（S-S，氧化态）数量成反比。因此，在肿瘤放疗实验中，放疗辐射产生的炎症反应一方面可以介导了 T 细胞的活化和肿瘤浸润，另一方面，炎症中的活性氧微环境也会通过氧化 T 细胞膜表面的自由巯基而影响浸润 T 细胞的免疫
Nat Immunol：华中科技大学黄波团队揭示记忆性 T 细胞通过氨解毒促进记忆形成的机制
糖和脂肪酸氧化是生成 ATP 的主要来源。此外，氨基酸在脱氨基后也可以被氧化以提供或调节能量生成。然而，在细胞产生 ATP 的过程中，作为副产物的活性氧（ROS）和氨（NH3）也不可避免地产生，且这两种物质都具有细胞毒性，损害细胞寿命。因此，长寿细胞必须利用高效的机制来清除 ROS 和氨以延长存活时间。 在前面的研究中，课题组已经揭示了记忆 T 细胞如何清除 ROS，但是 CD8+ Tm 细胞是否能通过代谢清除有毒的氨仍然是未解之谜。氨基酸的脱氨基是细胞内氨的主要来源，主要通过两个步骤：第一
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