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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
37
- 规格:
81孔
产品名称:81孔纸质冻存盒(适用于1.8-2ml冻存管)
单位 个
81孔纸质冻存盒(适用于1.8-2ml冻存管)
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文献和实验%。 经济适用版(推荐皮实型细胞) “10% DMSO +40%完全培养基+50% FBS”组合,性价比高,但保存效果略差于经典血清加DMSO组合。 进阶版 商业化无血清冻存液:尤其适用于无血清体系培养的细胞。 冻存密度 冻太少了:复苏后稀稀拉拉,养半个月才能传代。 冻太多了:冻存液不够用,细胞互相压死,DMSO毒性叠加。 冻存需有度,拿捏请看下表 索莱宝冻存建议 容器 1.8-2mL冻存管 推荐冻存体积
时间越长,BME溶解越充分。 ③4℃、200g离心5分钟收集类器官。 ④小心吸去上清,不要扰动沉淀。 ⑤(可选)若一个类器官培养物使用了多个15ml锥形管收集,将每个试管的沉淀重悬于1mladDMEM/F12+++培养基中,全部转移至一个15ml锥形管中。再次4℃、200g离心5分钟,小心吸去上清,不要扰动沉淀。 ⑥加入所需体积的无细胞冻存培养基,用P1000移液器上下吹打充分重悬类器官。 关键提示:每4个24孔细胞培养板的“原始”孔类器官使用500μl冻存培养基。 ⑦每个无菌冻存管加入500μ
,约1-2min。 3.【重悬】75%酒精擦拭冻存管外壁,安全柜内开盖,将细胞悬液沿管壁缓慢滴入含9mL预热完全培养基的离心管中,轻柔混匀。 4.【离心】300×g离心5min,弃上清,减少DMSO残留。 5.【重悬】加入1-2mL完全培养基轻轻吹打重悬;接种T25培养瓶(4-6mL培养基),十字混匀,标注名称、代次、日期。 6.【培养】放入37℃、5%CO2培养箱;24-48h贴壁后换液去除死细胞碎片。 二、细胞传代 1.【实验准备】配制完全培养基:MEM改良Eagle培养基(abs9467
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