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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5000
- 英文名:
Excellent Chemiluminescent Substrate
- CAS号:
H-E-60/125/250
- 保质期:
2年
- 供应商:
蒂科生物
- 保存条件:
4°C
- 规格:
60ml/125ml/250ml
| 产品介绍 | HAKATA ECL发光试剂,用于检测HRP(辣根过氧化物酶),标记的目的条带,检测 灵敏度最高可达飞克(fg)级,它优化了底物的成分,应用了新型的Enhancer和氧化剂,发光强度更高,稳定性更好,不含有毒试剂,安全性更高。 |
| 产品特色 | 1、灵敏度高 2、安全性高 3、信号持续时间长 4、稳定性高 5、经济适用 |
| 操作步骤 | 1、准备工作稀释液,将HAKATA ECL Ultra Luminol/Enhancer Reagent(A)和HATAKA ECL Ultra Stabilized Peroxide Reagent(B)按体积比例1:1混合。 注:为了获得最佳效果,使用前准备稀释液并立即使用。吸取NcmECL Ultra不同组份时要换移液管,以免污染试剂。 2、从TBST或PBST缓冲液的托盘中取出膜,小心移去膜上的多余缓冲液,但不要让膜干燥。 3、将膜上有蛋白的一面朝上平整地铺在一张纸板上,加上配好的工作稀释液。用量以覆盖膜为基准,1ml工作液可以覆盖大约10C㎡的膜。 4、将膜与工作稀释液孵育1-5min,以确保整个表面覆盖。 5、通过放射自显影胶片或成像设备获取信号。对于一个未知的信号,可调节不同曝光的时间来获得最佳结果。 |
| 保存条件 | 4℃保存,有效期 3年 |
| 运输条件 | 常温运输 |
| 常见问题 高膜背景 |
1.高浓度的抗体(建议:进一步稀释一抗和二抗,优化抗体稀释度)
2.低效的阻断(建议:增加Tween-20的TBST缓冲液,增加脱脂奶粉阻断缓冲液浓度)
3.洗涤不充分(建议:增加洗涤液体积,或者多增加洗涤次数和时间)
4.一抗的质量(建议:抗体自身的质量问题,或重新稀释新的一抗)
5.缓冲液污染(建议:检测缓冲液颗粒或细菌不纯物,或更换旧的缓冲液)
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| 不规则的黑点 |
1.膜上含有气泡(建议:轻轻将气泡移除)
2.被污染的设备(建议:蛋白质或残留的凝胶块可能会粘到膜上,抗体被困在其 中,因洗涤不佳,造成局部信号)
3.样品与膜相互作用(建议:始终用干净的塑料托盘,避免任何类型的交叉污染)
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| 注意事项 | 本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。 |
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验(All steps with agitation, unless done O/N at 4℃)►Rinse membrane once in TBS-T►Block the membrane with TBS-T/ 5% milk (or HIHS) for 30 min room►temp (can be left at 4℃ O/N here)►Rinse membrane briefly 2X with TBS-T and then once for 10 min with TBS
Western blotting using ECL reagent
REAGENTSECL Western blotting kit (Amersham Life Science; cat# RPN2108): contains second antibodies for both mouse and rabbit, substrate and milk blocker (the milk blocker is not normally used when using ruminant samples).Hybond ECL nitrocellulose
1 能量传递法:Heller等设计用两个紧接的探针,一个探针的一端用化学发光基团(供体)标记,另一个探针的一端用荧光物质标记,并且这两个探针靠得很近。两个靠得很近的探针用不同的物质标记(标记光发射),当探针与特异的靶杂交后,这些标记物靠得很近。一种标记物发射的光被另一种标记物吸收,并重新发出不同波长的光,调节 检测器使自动记录第二次发射光的波长。只有在两个探针分子靠得近时,才能产生受激发光,因此这种方法具有较好的特异性。 2 吖啶翁酯标记法:吖啶翁酯标记探针与靶核酸杂交后,未杂交
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