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100管/96样
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文献和实验思的是,生命有机分子绝大多数具有手性,且几乎都以单一异构体形式存在。 自然界中氨基酸有 L 和 D 两种对映异构体,除甘氨酸不具有手性外,组成蛋白质的其他氨基酸几乎都为 L 型。D 型氨基酸作为哺乳动物神经和内分泌系统中一类重要的神经和激素调节物质,具有重要的生理功能。不同于 L 型,D 型氨基酸的含量往往较低,其来源除了通过自身的合成外,主要通过食物的摄入和体内肠道菌的合成,特别是部分哺乳动物自身难以合成的重要 D 型氨基酸。同时,宏基因组研究也揭示人类肠菌 D 型氨基酸的生物合成和与 II 型糖
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色
的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
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