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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ 至 -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Human WAS qPCR primer pairs
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
反应种属:Human
引物靶点:WAS
引物保存条件:The lyophilized product is stable for one year from date of receipt when stored at -20℃. The suspended product is stable for six months from date of receipt when stored at -20℃.
GeneBank ID:
序列长度:0
引物描述:Verified forward and reverse primers for analyzing the quantitative expression of gene
引物质控信息:The primer mix has been verified to generate satisfactory qPCR data on Roche LightCycler480
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文献和实验,是不是不好啊?不要着急,看看 Product length:1657bp,放心吧,这么长的产物,qPCR 是扩增不出来的(一般 500bp 就比较难扩增出来了)。所以结合以上判定方法,你选的引物基本上就能跑出漂亮的溶解曲线了,为什么不说百分之一百,因为这还取决于你提取的 RNA 合格不!上面介绍的这种查找 qPCR 的引物的方法在我这里是屡试不爽,介绍给实验室的同学和师弟师妹们用也是深受好评,primer bank 里面同一个基因引物基本不会超过 3 对,只要你不是选择困难症患者,整个操作
荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外,qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况: 1. 复孔间重复性差怎么办? 复孔间重复性差一般会有以下两种情况: (1)CT 值很大,如 CT≥ 30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法:如果融解曲线没有杂峰,无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上,那 CT 值为准确的,可多设置
一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用
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