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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
A DNA sequence encoding the extracellular domain of mouse CTSE (NP_031825.2) (Met 1-Pro 397) was expressed, with a polyhistidine tag at the C-terminus.
- 亚型:
见说明书
- 形态:
液体
- 保存条件:
4℃
- 克隆性:
无
- 标记物:
见说明书
- 适应物种:
Mouse
- 保质期:
12个月
- 抗原来源:
见说明书
- 目录编号:
50564-M08HL
- 级别:
免疫学
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 宿主:
HEK293 Cells
- 应用范围:
WB
- 浓度:
见说明书
- 靶点:
CTSE
- 抗体英文名:
Mouse Cathepsin E / CTSE HEK293 Cell Lysate (WB positive control)
- 抗体名:
Mouse Cathepsin E / CTSE HEK293 Cell Lysate (WB positive control)
- 规格:
300 µg
反应种属:Mouse
裂解液靶点:CTSE
裂解液应用:WB
裂解液保存条件:Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
裂解液产品描述:Human Cell lysate that Mouse CTSE / Cathepsin-E transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
裂解液表达宿主:HEK293 Cells
裂解液制备方法:Cell lysate was prepared by homogenization of the over-expressed cells in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
裂解液Buffer:Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
裂解液质控信息:12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
裂解液使用建议:1. Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2. Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min.
裂解液稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
裂解液使用说明:Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested. Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
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文献和实验「救命!做 WB 蛋白样品提取时,样品加入裂解液,离心后发现管里有很多的胶状物,非常粘稠,有点像鼻涕!多加裂解液稀释一下仍然没有效果,蛋白浓度还变得很低。不死心的我把它戳出来玩了一会,戳戳戳仍然是一大团,这粘稠物是什么?对我的后续实验会有什么影响?」 当你看到这团粘稠的「鼻涕」,就意味着你即将经历下面五个难题的考验: 1. 样品吸液困难 堵塞移液器:离心后吸上清液的时候胶状物会堵塞移液器头,移液后上清液所剩无几。 无法分离上清液:样品太
就是看 wiki 百科了。从 wiki 的介绍里可以看到,这个受体在神经元里是能够表达的,所以这个问题就解决了。三:蛋白在哪里?这个从 wiki 百科第一句话我们就看到了,这是一个 G 蛋白偶联受体,肯定是一个跨膜蛋白无疑了,这也意味着这个蛋白不是那么容易做的。四:如果是跨膜蛋白,跨几次?既然是跨膜蛋白,跨了几次膜,有几个压基在胞外,有几个亚基在胞内?这时我们可以用 SOSUI 这个网站来查询。 五:蛋白的序列?分子量?PI?我们先要从 NCBI 里查找一下这个蛋白质的氨基酸序列,我们以小鼠为例(mus
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法,然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做!这是因为处于不同的细胞生长状况和 / 或特定的细胞周期时,磷酸化蛋白可能仅占细胞总蛋白中的一小部分,处理不得当时,还会快速的去磷酸化。磷酸化蛋白质 WB 做不好的原因有许多,比如封闭问题,抗体问题,或所需的磷酸化蛋白可能不存在于样品中或者低于 WB 检测的量。然而,有一个常被大家忽视的重要原因就是蛋白样品制备所用的方法是否适合于磷酸化蛋白的提取?其实蛋白质提取的方法不仅影响提取效率,还会影响蛋白的质量
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