- ￥1560
- Sino Biological
- 北京
- 50530-M08HL
- 2025年08月12日
- WB
- HEK293 Cells
- Mouse
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原：
A DNA sequence encoding the mouse KIT isoform 1 (NP_001116205.1) extracellular domain (Met 1-Thr 523) was fused with a polyhistidine tag at the C-terminus.
- 亚型：
见说明书
- 形态：
液体
- 保存条件：
4℃
- 克隆性：
无
- 标记物：
见说明书
- 适应物种：
Mouse
- 保质期：
12个月
- 抗原来源：
见说明书
- 目录编号：
50530-M08HL
- 级别：
免疫学
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 宿主：
HEK293 Cells
- 应用范围：
WB
- 浓度：
见说明书
- 靶点：
KIT
- 抗体英文名：
Mouse c-kit / CD117 HEK293 Cell Lysate (WB positive control)
- 抗体名：
Mouse c-kit / CD117 HEK293 Cell Lysate (WB positive control)
- 规格：
300 µg
反应种属：Mouse
裂解液靶点：KIT
裂解液应用：WB
裂解液保存条件：Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
裂解液产品描述：Human Cell lysate that Mouse c-kit / CD117 transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
裂解液表达宿主：HEK293 Cells
裂解液制备方法：Cell lysate was prepared by homogenization of the over-expressed cells in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
裂解液Buffer：Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
裂解液质控信息：12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
裂解液使用建议：1. Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2. Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min.
裂解液稳定性：Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
裂解液使用说明：Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested. Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
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文献和实验。 5. 粘稠的样品通常无法获得好结果 蛋白丢失：粘稠物包裹蛋白导致无法释放，样品很难跑出理想的结果，有时甚至是完全没有条带。 令人反感的粘稠「鼻涕」是怎么形成的？ 问题出在细胞裂解过程中，细胞中的 DNA 缠绕其他大分子物质，导致蛋白质聚集，再加上其他细胞碎片（如油脂、难溶蛋白等）共同形成粘稠的「鼻涕」状态，也被称为「核酸残团」。 核酸残团的存在大大降低了蛋白的提取效率，使得蛋白丢失，从而导致了 WB 实验中的一系列问题。曾有研究者用不同方法进行小鼠脾脏和肝
yukituki 最近做Akt的WB遇到了问题： 我用的是CST的Akt抗体以及pAkt抗体，染小鼠组织（肝，肾，脾，肺，脑等）。 5%BSA（TBST稀释）4度封闭过夜 之后一抗是5%脱脂牛奶稀释，1：500，过夜，二抗1：2000稀释，2-3h 染出来的片子很脏，而且Akt勉强可以见到，但是pAkt没染出来条带 提组织用的是RIPA（每100mg用500ul），加了PMSF以及NaF，冰上
细胞凋亡是一种在基因控制下的细胞主动死亡过程，通常表现为核浓缩，起皱，膜发泡以及 DNA 片段化。WB 是研究细胞凋亡机理的基本方法之一，但是 WB 也不是谁都能做成功的，因为有可能你的第一步就做错了！用 WB 做细胞凋亡研究样品制备是第一步，样品制备方法至关重要否则会得到错误的结果和结论。样品制备，看你是不是这样做的：自配裂解液或者购买 RIPA，加上样品研磨啊研磨，孵育啊孵育，然后离心扔掉沉淀（RIPA 不可溶组分），取上清（RIPA 可溶组分）进行下游实验。对对对！都是这么做啊，扔
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