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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
A DNA sequence encoding the human TNFRSF10A (NP_003835.2) extracellular domain (Met 1-Asn 239) was expressed, fused with a polyhistidine tag at the C-terminus.
- 亚型:
见说明书
- 形态:
液体
- 保存条件:
4℃
- 克隆性:
无
- 标记物:
见说明书
- 适应物种:
Human
- 保质期:
12个月
- 抗原来源:
见说明书
- 目录编号:
10408-H08HL
- 级别:
免疫学
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 宿主:
HEK293 Cells
- 应用范围:
WB
- 浓度:
见说明书
- 靶点:
TNFRSF10A
- 抗体英文名:
Human TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A HEK293 Cell Lysate (WB positive control)
- 抗体名:
Human TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A HEK293 Cell Lysate (WB positive control)
- 规格:
300 µg
反应种属:Human
裂解液靶点:TNFRSF10A
裂解液应用:WB
裂解液保存条件:Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
裂解液产品描述:Human Cell lysate that Human TNFRSF10A / CD261 / APO2 transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
裂解液表达宿主:HEK293 Cells
裂解液制备方法:Cell lysate was prepared by homogenization of the over-expressed cells in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
裂解液Buffer:Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
裂解液质控信息:12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
裂解液使用建议:1. Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2. Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min.
裂解液稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
裂解液使用说明:Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested. Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
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文献和实验我是一个门外汉,刚刚做WB。做出来后全是模糊的片子,还有就是只有黑点,没有条带。一直没找到原因。恳请各位高人教导。并且按照以下的方法做。我做的是SD大鼠骨骼肌组织的蛋白检测,取300mg肌肉,最终加2.4ML裂解液。10000转离心10分钟。定蛋白也是按一下方法。上样按每10微升80微克蛋白上的样。用的是大连竞迈公司的垂直电泳仪。装模是半干法,按没分钟1KD转的。一抗1:1000.二抗1:6000。。 我测的蛋白在95KD左右,一半装2-2.5小时。但是结果不是背景强就是没东西。而且经常
-1 的酪氨酸磷酸化(P-Cav-1)被发现是由 p38 丝裂原活化激酶和 c-Src 激酶的激活介导的[6] 。当使用 Triton-X-100 和 RIPA 提取 NIH3T3 细胞时,在可溶性组分中未检测到 caveolin 蛋白,仅在不可溶性部分[7]和下图(RIPA 不可溶组分但 SDS 可溶组分)中检测到。 也就是说如果在这种情况下使用 RIPA 可溶性组分来检测 P-Cav-1 将无法被检出。对于特定时间的特定样品,磷酸化和非磷酸化蛋白质的总和代表该特定蛋白质的总量。在相同的 WB 检测中
(无)条带,如抗体无专一性则条带无变化举个例子,癌症免疫常用的 PD-L1 抗体,下图可看到 GTX104763 PD-L1 抗体,使用基因敲弱的细胞裂解液,WB 的条带会随之变弱,显示 GTX104763 抗体具有高特异性。GTX104763 还适合多种应用,包括 WB、ICC/IF、IHC-P(可达 1:1,000)、 IHC-Fr(可达 1:1,000),及多篇文献引用,为高敏、高特异性的可靠抗体工具。又如白血病标记物-CD44,CD44 参与介导细胞存活的迁移、增殖、分化和信号传导途径。GTX
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