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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Influenza A H7N9 Neuraminidase Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-Flag tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:NA
反应种属:H7N9
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Influenza A H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Neuraminidase with C terminal Flag tag.
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文献和实验聚合酶识别)和两个乳糖操纵子识别序列,以保证与乳糖抑制子的结合从而抑制T5启动子的表达。合成的核糖体结合位点RBSⅡ,保证高效的翻译在克隆区域的5'或者3'含有6×组氨酸标签有多个终止密码子,无论你的片段从多克隆位点的哪里插入都可以正确的终止。两个强而有利的转录终止子:来自λ噬菌体的t0和来自大肠杆菌rrnB操纵元的T1,可以有效预防转录中的通读现象并保证表达质粒的稳定性。所有质粒含有β- 内酰胺酶(bla)基因,因此氨苄霉素抗性,在t0和T1间插入有氯
柱就可以方便的去除蛋白酶和融合标签,令实验越来越方便了。 pET原核表达金标准 对于全世界许多研究者, Novagen 的 pET 系统已成为在大肠杆菌中蛋白表达的首选。该系统成功的一个主要原因是目标基因被克隆到不为大肠杆菌 RNA 聚合酶识别的 T7 启动子之下,因此在加入 T7 RNA 聚合酶之前几乎没有表达发生。克隆到 pET 载体的基因实际上是被关闭的,不会由于产生的蛋白对细胞有毒性而引起质粒不稳定。重组质粒转移到染色体上含有一拷贝由 lacUV5 控制的 T7 RNA
关,当然也不是越多越好,超过细胞的承受范围反而会损害细胞的生长。如果碰巧需要2个质粒共转化,就要考虑复制元是否相容的问题。筛选标记和报告基因: 氨苄青霉素抗性是最常见的筛选标记,卡那霉素或者是新霉素次之,通常是另一个载体的筛选标记用。四环素,红霉素和氯霉素等已经日渐式微。抗性基因的选择要注意是否会对研究对象产生干扰,比如代谢研究中要留意抗性基因编码的酶是否和代谢物相互作用。在表达筛选中要注意的问题应该就是LB倒板前加抗生素的温度,温度过高容易导致抗生素失效。今天耐青霉素的超级细菌泛滥,不知道是否有我们实验
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