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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Dengue virus 3 DENV-3 capsid protein Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-HA tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:DENV-C
反应种属:DENV
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Dengue virus DENV-3 (strain H87) capsid protein C with C terminal HA tag.
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文献和实验Gateway技术提供以下可能: 通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 同时将您的基因转移到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外,细菌,酵母,昆虫,或哺乳动物――分析表达 一、一种更好的克隆方法 Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统(图1)。这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤,而同时典型的克隆效率高达95%或更高。当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时,还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway也有助于进行带不同数目
产物,为避免这种情况,确保在cDNA合成之前评估RNA的完整性,并通过洗涤去除RNA纯化方案中使用的痕量试剂RNA颗粒完全含有75%乙醇。错误的PCR产物也可能由故障引物设计和次优的热循环条件引起,因此如果发生这种情况,最好重新设计引物并优化热循环条件和反应条件。不要忘记在PCR中使用高保真的热稳定DNA聚合酶,并将PCR产物暴露在紫外线下几秒钟以避免序列错误。在限制酶位于引物中之前,需要添加额外的碱基以进行有效的切割。将DNA片段亚克隆到pET-32α(+)表达载体中由具有指定限制性酶切位点的公司合成
交互扣除(reciprocal subtraction):首先是要获得两个具有差别基因表达的细胞系的cDNA文库,然后将这两个文库进行交互扣除杂交,从而获得两个扣除cDNA文库。随后通过体内剪切得到质粒cDNA文库; ②差异显示(differential display):由交互扣除cDNA文库获得的纯化质粒可直接进行差异显示,这包括PCR扩增(加入3种3′锚定引物和18种5′随机引物)和进行5%序列胶电泳并切割回收差异显示条带; ③表达分析(expression analysis):运用
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