Sino Biological 大鼠TTPA基因慢病毒表达质粒 基因过表达慢病毒载体

慢病毒载体介导的基因转移

性，不再仅限于感染CD4+细胞，还减少了产生RCV的可能。载体质粒含有HIV―I包装、反转录、整合所需要的关键顺式元件。将三质粒共同转染细胞，在被转染细胞的上清液中收获只有一次感染能力、复制缺陷的慢病毒载体颗粒。应用这种慢病毒载体，人们已经成功地将目的基因转入人造血干细胞，免疫功能正常大鼠的脑、肌肉、肝脏组织及小鼠的视网膜，并获得了外源基因较长时间的表达。为了进一步提高慢病毒载体的安全性，将HIV―I载体质粒的3’端LTRU3区删除，发展为自身灭活载体。这种删除了U3区的3’端LTR在反转录后成为

慢病毒载体介导的肝细胞基因转移

【摘要】　慢病毒(lentivirus) 具有可以感染低分裂细胞的独特优势,且基因转移效率高,操作相对简便,在多种疾病的基因治疗、转基因动物的制备等方面成为引人瞩目的病毒载体。本文就慢病毒载体(lentiviral vector ,LV) 的特点、构建、应用,尤其是慢病毒载体对于肝细胞的基因转移进行综述。 【关键词】　慢病毒载体;肝细胞 　疾病的基因治疗目前已引起越来越多的重视。在基因治疗中一个重要的方面即是基因转移载体的选择

献给初学者：如何在细胞中稳定表达基因

作为细胞生物学专业的博士生，在基因功能研究上已经有五年的经验了，今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计，慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点，为了避免移码突变，上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel，下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法，首先设计引物将目的基因 PCR 出来，即酶切位点加基因引物，此时应注意，为了防止酶切将基因破坏，通常习惯在两端