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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Rat Angiotensin Converting Enzyme 1 Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:ACE
反应种属:Rat
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Rat angiotensin I converting enzyme (peptidyl-dipeptidase A) 1 with C terminal GFPSpark tag.
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文献和实验一,酵母表达系统毕赤酵母表达系统(invitrogen公司):分泌型质粒pPIC9K,宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha (甲醇诱导)宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二,原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签(N端):PET5-(a)氨苄抗性带His标签(N端):PET28-(a)卡那抗性带His标签(C端):PET24-(b)卡那抗性带His标签(C端):PET21-(a)氨苄抗性带His标签(N端)+TrxA(硫氧还蛋白):PET-32
聚合酶识别)和两个乳糖操纵子识别序列,以保证与乳糖抑制子的结合从而抑制T5启动子的表达。合成的核糖体结合位点RBSⅡ,保证高效的翻译在克隆区域的5'或者3'含有6×组氨酸标签有多个终止密码子,无论你的片段从多克隆位点的哪里插入都可以正确的终止。两个强而有利的转录终止子:来自λ噬菌体的t0和来自大肠杆菌rrnB操纵元的T1,可以有效预防转录中的通读现象并保证表达质粒的稳定性。所有质粒含有β- 内酰胺酶(bla)基因,因此氨苄霉素抗性,在t0和T1间插入有氯霉素乙酰化转移酶基因
regions,UTRs),原因是这些地方有丰富的调控蛋白结合区域,而这些UTR结合蛋白或者翻译起始复合物可能会影响siRNP核酸内切酶复合物结 合mRNA从而影响siRNA的效果. (2)、序列同源性分析: 将潜在的序列和相应的基因组数据库(人,或者小鼠,大鼠等等)进行比较,排除那些和其他编码序列/EST同源的序列.例如使用BLAST( www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)选出合适的目标序列进行合成.并非所有符合条件的siRNA都一样有效,其原因还不清楚,可能是位置效应的结果
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