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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Mouse Calnexin / CANX Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-OFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:CANX
反应种属:Mouse
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Mouse calnexin with C terminal OFPSpark / RFP tag.
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文献和实验细胞中通过siRNA成功诱导了特异性靶基因表达沉默后,RNA干扰技术就作为一项特异性基因沉默的有效工具从低等生物成功进军哺乳动物领域。2003年Rubinson DA等又在Nature Genetics上报道用病毒系统在原代哺乳动物细胞,干细胞和转基因小鼠上都取得了RNA干扰成功,更大大扩展了这项技术的应用范围。研究者们可以利用这项技术对目标基因进行特异性地表达沉默,通过观察其表达被抑制后细胞以至生物体从形态到各项生理生化的变化,对该基因的功能及参与的信号网络进行研究。这比传统的基因敲除方法要简单而且方便得多
双链短RNA(dsRNA)阻断基因表达机理及双链RNA的构建
链[4,5]。结果mRNA也变成了双链RNA,它在Dicer酶的作用下也被裂解成siRNA。这些新生成的 siRNA也具有诱发RNAi的作用,通过这个聚合酶链式反应,细胞内的siRNA大大增加,显著增加了对基因表达的抑制。从21到23个核苷酸的 siRNA到几百个核苷酸的双链RNA都能诱发RNAi,但长的双链RNA阻断基因表达的效果明显强于短的双链RNA。 二. 哺乳动物细胞中的RNAi 在小鼠的胚胎细胞中也存在RNAi,将727个碱基对的双链RNA转入小鼠的畸胎瘤细胞,诱发了细胞内的RNAi
诱导方式方面,目前报道的成功的siRNA形式多样,其中短发夹结构RNA(shRNA,short hairpin RNA)表达载体的应用大大加快了研究者从最初的培养细胞水平扩展到成体水平的步伐。例如,在神经生物学研究中,美国NIH的Backman C等通过siRNA表达质粒对中脑腹侧神经细胞中的多巴胺能相关基因进行了有效抑制, Hommel JD等还通过病毒介导的RNAi建立了此类成年小鼠模型,不仅为建立神经系统的功能缺失模型找到了一些有价值的表型标记,对神经系统的基因治疗也有一定借鉴意义;在癌
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