- ￥1770
- Sino Biological
- 北京
- HG12941-UT
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Human PPP6C Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：PPP6C
反应种属：Human
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human protein phosphatase 6, catalytic subunit
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文献和实验shRNAs(short hairpin RNAs)在哺乳动物细胞中引发的基因沉默
,我们利用U6 RNA polymerase Ⅲ启动子产生的含有反向重复序列(21-29核苷酸)的转录子来形成shRNA，它能被Dicer加工并进入RNAi途径。携带有shRNA表达载体的质粒短暂转染哺乳动物细胞足以引起基因沉默。令人惊奇的是,应用不同靶定效率的shRNA，能产生类似表观等位基因现象的一系列不同程度的基因沉默。 几个因素可能影响基因沉默的效率,像靶序列的特征、转染的效率以及靶向mRNA和蛋白的丰度及稳定性。对于表达的shRNA,我们推荐每个靶基因采用3-6个不同的发夹
试剂、转染时的细胞丰度。 2、 挑选了稳定表达GFP的克隆，培养后，发现荧光变弱或是不稳定，可能的原因是什么？ 筛选任何稳定表达的基因，都有可能遇到类似的问题，因为荧光检测特别敏感、方便，所以这类问题更容易被观察到。出现这类问题，可能的原因是： 1） 挑选的单克隆不纯，混有其他细胞； 2） 即使是单克隆来源的细胞群，荧光的表达也可能不同。选择压力、细胞的生长丰度的改变都可能引起荧光表达不同。 3、挑选了稳定表达GFP的克隆，培养后，发现荧光变弱或是不稳定，该怎么办？ 1） 瞬时转染时
是什么？ 筛选任何稳定表达的基因，都有可能遇到类似的问题，因为荧光检测特别敏感、方便，所以这类问题更容易被观察到。出现这类问题，可能的原因是： 1） 挑选的单克隆不纯，混有其他细胞； 2） 即使是单克隆来源的细胞群，荧光的表达也可能不同。选择压力、细胞的生长丰度的改变都可能引起荧光表达不同。 3、挑选了稳定表达GFP的克隆，培养后，发现荧光变弱或是不稳定，该怎么办？ 1） 瞬时转染时，质粒进入细胞后以游离的形式存在。目的基因的表达是通过细胞的转录与翻译机制进行的。一个细胞可能‘吞入’数个
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