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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human KRTAP17-1 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:KRTAP17-1
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human keratin associated protein 17-1
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文献和实验机制。 点评:实验机制王道文章 2. 案例-CRISPR-Cas9 期刊:Nature (IF=40.137) Joung et al. Genome-scale activation screen identifies a lncRNA locus regulating a gene neighbourhood. Nature. 2017 Aug 17;548(7667):343-346 哺乳动物基因组包含数万个长链非编码RNA的基因座,其中一些已被发现在生命过程中发挥重要作用
。整个实验操作流程提供长期稳定及规模可调的蛋白生产。与稳定基因表达相比,瞬时表达(TGE)主要适用于短期内制备重组蛋白,普健生物的瞬时表达使用悬浮细胞,能够完成mL到100L的体积的蛋白表达,一般在10天内即可快速转染,无需质粒DNA的遗传性选择。 08转染效率监测 基因的瞬时表达在24-72小时内就结束了。这种快速的瞬时表达非常适用于验证质粒表达和监测转染步骤的效率。 可以使用报告基因来确定优化条件,其表达蛋白易检测,在目的细胞中不含此蛋白或水平很低。常用的报告基因包括氯霉素乙酰转移酶(CAT
选择是RNAi实验成败的关键。哺乳动物细胞RNAi实验中,使用最广泛且最有效的是21bp siRNA。siRNA由正义链和反义链组成,两条链3’端均有2个碱基突出,一般为UU或dTdT,其中正义链的前19nt与靶基因序列相同。1. siRNA设计的原则SiRNA双链设计时,一般在靶mRNA起始密码下游100—200bp至翻译终止密码上游d0—100bp的范围内搜寻AA序列,并记录每个AA3’端相邻19个核苷酸作为候选si.RNA靶位点。其中AA(N19)TT是最理想的序列,若靶mRNA中无此序列,亦可
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