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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human FRRS1L Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:FRRS1L
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human ferric-chelate reductase 1-like
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文献和实验通过高速离心对载体进行浓缩,提高了滴度; 转移质粒中除含有包装、逆转录及整合所需的顺式序列,还保留 350 bp 的 gag 和 RRE,并在其中插入目的基因或标志基因 ( 绿色荧光蛋白 GFP) 。将载体系统分成三个质粒最大的益处是使序列重叠的机会大大减少,减少载体重组过程中产生 RCV 的可能性。通过三质粒共转染 293T 细胞,超速离心后病毒滴度可达 109IU /m l 。 3. 四质粒表达系统 为了减少 HIV 21 包装结构的序列同源性,进一步减少重组成 RCV 的可
通过2类方法 :一是感染性病毒颗粒感染宿主细胞,二是通过脂质体法、显微注射法 、磷酸钙共沉淀法及DEAE一葡聚糖法等非病毒载体的方式将基因导入到细胞中。外源基因的体外表达一般采用质粒表达载体,如将重组质粒导入CHO细胞可建立高效稳定的表达系统,而利用COS细胞可建立瞬时表达系统。目前,病毒载体已成为动物体内表达外源基因的有力工具,在临床基因治疗的探索中也发挥了重要作用。痘苗病毒由于其基因的分子量相当大(约187kb),利用它作为载体可同时插入几种外源基因,从 而构 建多价疫苗。另外,逆转
Invitrogen的王牌:Lipofectamine 2000转染试剂
稳定表达,转入的基因必须能和细胞同步复制。在转染的质粒自发整合到宿主基因组上时就会如此。在一小部分转染的细胞中,加入的DNA通过重组整合到基因组上。包含整合DNA的细胞很少,必须通过对药物的抗性筛选进行扩增或通过表型变化进行鉴定。稳定基因表达实验需要数周,如果需要验证蛋白产量,所需的时间更长。但得到的细胞系可以做为蛋白生产的稳定来源或用于得到转基因动物。 瞬时转染和转染效率的监测:基因的瞬时表达在24-72小时内就结束了。这种快速的瞬时表达非常适用于验证质粒表达和监测转染步骤的效率
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