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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human EPB41L4B Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:EPB41L4B
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human erythrocyte membrane protein band 4.1 like 4B
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文献和实验shRNAs(short hairpin RNAs)在哺乳动物细胞中引发的基因沉默
(double-stranded RNA)诱导的基因沉默广泛存在于各种物种当中,包括植物、真菌、昆虫、原生动物以及真核生物等[1] 。通过研究小片段干扰RNAs(siRNAs)和表达后的shRNAs在哺乳动物细胞中的作用,研究人员发现人或鼠基因组的任何基因都能成为dsRNAs诱导基因沉默的靶向基因。因此,RNAi很快成为哺乳动物细胞体系研究的标准实验技术。 我们和其他一些实验室构建了用于哺乳动物细胞产生小片段dsRNA的体内表达载体,类似于内源表达的hairpin RNAs[2]。在试验中
shRNA表达质粒多采用RNA聚合酶III启动子,如人源H1或鼠源U6启动子,pol III在哺乳动物细胞(绵羊是哺乳动物)内引导非编码小RNA的转录,转录产物无poly(A)尾,且在转录过程中遇到连续4-5个U时转录终止。此载体最后转录出的产物是经折叠形成的发夹状小RNA(shRNA); shRNA 在细胞内被Dicer酶切割成3’端带有两个U突出的siRNA,进而启动RNAi,介导基因沉默。载体中的间隔序列为9个核苷酸时最为有效。 是可行的! 高成胡君
化的胚胎细胞中,上述防御病毒的机制存在缺陷,因而双链RNA能特异的阻断基因的表达。 由于大于30个核苷酸的双链RNA非特异的阻断哺乳动物成体细胞中的基因表达,RNAi在哺乳动物成体细胞中的应用受到限制。但Tuschl等人的研究工作克服了这一障碍。他们发现,21个核苷酸的双链RNA能够诱发哺乳动物细胞内的RNAi机制,同时不会激活细胞内的干扰素。他们合成了以荧光素酶的mRNA为靶分子的21个核苷酸的双链RNA,将它和荧光素酶的表达质粒用脂质体共转染到NIH3T3,COS-7,Hela S3
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