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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human HRC Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:HRC
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human histidine rich calcium binding protein
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文献和实验mRNA逆转录合成的双链cDNA分子。由于基因组DNA较大,不利于克隆,因此有必要将其处理成适合克隆的DNA小片段,常用的方法有机械切割和核酸限制性内切酶消化。若是基因序列已知而且比较小就可用人工化学直接合成。如果基因的两端部分序列已知,根据已知序列设计引物,从基因组DNA 或cDNA中通过PCR技术可以获得目的基因。二 载体的选择基因工程的载体应具有一些基本的性质:1)在宿主细胞中有独立的复制和表达的能力,这样才能使外源重组的DNA片段得以扩增。2)分子量尽可能小,以利于在宿主细胞中有较多的拷贝
模cDNA文库测序的序列中确定新基因:首先确定获得的cDNA是否为基因全长cDNA,确定是否有典型的ORF及3’端及5’端。而后可以通过网上搜索确定是否为新的基因,同源比对在判断是否为新基因,若通过检验则为新的基因。10 基因分离克隆的新技术除上述几种基本的方法外,随着生物技术的发展和传统技术的改良,基因可隆的方法又有许多新的技术出现。如基因表达序类标记分析(SAGE);由DDRT-PCR演变而来的代表性差异分析(RDA),包括基因组DNA(gDNA)的RDA和cDNA的RDA;抑制型差减杂交(SSH
以上,这时其ORF超过3000bp,做高保真PCR有难度。注:基金申请中,有时看到申请者人无意识的选做的恰就是大分子量蛋白,可谓不知者者无畏)。 5、但事实上真正的困难还是在于基因的外源表达和功能/活性等后续检测。 所以,建议你先做基因表达检测,然后选择性的再做基因克隆表达。 首先非常感谢这么细致的回复。 我想知道,基因克隆到绿色阳光蛋白载体中,转染细胞后,是否在细胞中看到绿色荧光蛋白就可以认为目的蛋白表达了,还需要进行抗体
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