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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human TERF1/TRF1 Gene Lentiviral ORF cDNA expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:TERF1
反应种属:Human
应用说明:
cDNA描述:Full length Clone DNA of Homo sapiens telomeric repeat binding factor (NIMA-interacting) 1.
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文献和实验作为细胞生物学专业的博士生,在基因功能研究上已经有五年的经验了,今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计,慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点,为了避免移码突变,上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel,下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法,首先设计引物将目的基因 PCR 出来,即酶切位点加基因引物,此时应注意,为了防止酶切将基因破坏,通常习惯在两端
的表达水平60%以上的病毒。 «包装好一个产品的周期大概需要多久呢? 一般而言载体构建及准备需要10-15个工作日,病毒包装及扩增需要20-30个工作日,滴度测定需要5-10个工作日,总计需要35-55个工作日。 «利用慢病毒载体的优势在于? (1)对于一些较难转染的细胞,如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,慢病毒能大大提高目的基因转导效率,而且目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加,这就为RNAi,cDNA 克隆以及报告基因的研究提供了一个有利
lf2003128245 本人手上有个慢病毒的质粒,目的基因是通过SalI酶切位点插入的,我想将这个基因切下来重新构建,希望有经验的大侠能够指点,可以选择些什么样的质粒呀,最好是带有GFP标记的非病毒质粒,还有个问题请教就是,病毒载体是不是不需要类似于G418筛选的标记呀?如果我找到个质粒,将这个基因连上去之后,怎么才能鉴别/筛选目的基因正反向的问题?谢谢了! fjxie 目的基因是通过SalI酶切位点插入的,我想将这个基因
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