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刺激隐核虫核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

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  • ¥1966
  • 沪震生物
  • HZ-032111
  • 中国
  • 2025年07月15日
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      刺激隐核虫核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

    • 保质期

      有效期 12 个月

    • 供应商

      上海沪震实业有限公司

    • 保存条件

      请于-20℃条件下保存

    • 规格

      48T

    刺激隐核虫核酸检测试剂盒(一管式恒温荧光法)

    ◆ 产品说明

    动物疫病检测系列基于独特的恒温荧光检测技术,可针对食品、动物组织等样品中病原的特异核酸片

    段进行扩增,通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于刺激隐核虫的检测,检出限为 103copies/μl 基因组 DNA。

    ◆ 产品组成(48 测试)

    试剂 含量

    A-CI-I 22μL× 48 管

    B-I 90μL × 1 支

    PG-CI-I 50μL × 1 支

    ◆ 适用仪器

    Dhelix-C、ESE Tube Scanner、Genie II、Deaou-308C 等恒温荧光检测仪,ABI 7500,LightCycler480,CFX 96 等

    荧光 PCR 仪。

    ◆ 自备耗材和仪器

    ①灭菌 1.5mL 或 2.0mL 离心管;②冰盒;③移液器(0.1-2.5μL,0.5-10μL,10-100μL,100-1000μL)及配套灭

    菌吸头;④离心机;⑤涡旋混匀器;⑥金属浴

    ◆ 注意事项

    1.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。

     1)第一区:样本制备区。

    2)第二区:模板添加区。

     3)第三区:扩增及产物分析区。

    ★分区之间最好进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。

    2.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。

    3.严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。

    4.反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心 30

    秒。

    5.反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。

    6.不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。

    ◆ 样品处理

    参照《SC/T 7217-2014 刺激隐核虫病毒诊断规程》或其他标准处理样品,制备的样本保存待用。

    详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。

    ◆ 实验操作

    1. 模板制备(样本制备区)

    建议使用配套水生动物病害基因组 DNA/RNA 提取试剂盒系列产品。

    2.添加模板(模板添加区,放置于冰盒中进行)

    取出所需测试数的已含有反应液 A-CI-I 的 PCR 管,将试剂完全解冻,离心 30 秒,在管盖上标记管名(阴性对

    照管 NG、样品 XX、阳性对照管 PG)。打开管盖向各管管底分别加入 1μL B-I,盖上阴性对照管管盖,其他各管分

    请于-20℃条件下保存,有效期 12 个月

    别沿管壁加入 2μL 模板,顺序为待测样品模板、PG-CI-I,依次盖好各管管盖,离心 30 秒,立即进行扩增反应。

    3. 扩增反应(扩增及产物分析区)

    ①恒温仪器 63℃条件下反应 60 min。待仪器升温至 63℃后,新建程序,设置实验名称及反应时间,将步骤 2 中

    离心后的 PCR 反应管放入恒温荧光分子检测仪,点击开始检测。

    ②若使用荧光定量 PCR 仪,则荧光基团选择 FAM,淬灭基团选择 None,将 63℃ 15 s,63℃ 45 s 作为一个

    循环,于 63℃ 45 s 处收集荧光信号,60 个循环。

     

    其他仪器请参照仪器说明书进行设置。

    ◆ 结果判定

    ①仪器自动判定结果,若显示“阳性”,则样品中含有刺激隐核虫;若显示“阴性”,且没有出现 S 型扩增曲线,

    则样品中不含有刺激隐核虫或含量低于检测限。

    ②在荧光定量 PCR 仪上,根据有无“S”型扩增曲线判定结果。若有“S”型扩增曲线,则样品中含有刺激隐核虫;

    若无“S”型扩增曲线,则样品中不含有刺激隐核虫或含量低于检测限。

    ★ NG 反应管结果显示“阴性”,PG 反应管结果显示“阳性”,此次检测结果有效,否则无效。如重复检测结果

     

    仍为无效,请与技术支持人员联系。

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