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上海羽朵生物科技有限公司
型号、规格:24测试/盒。
主要组成成分:试剂盒Ⅰ(重亚硫酸盐转化试剂):重亚硫酸盐、转化液A、转化液B、MB结合缓冲液、洗涤液、脱硫液、DNA洗脱液、纯化柱、收集管。 试剂盒Ⅱ(荧光PCR扩增试剂):MGMT扩增反应液、外控扩增反应液、Taq DNA聚合酶、阴性对照、阳性对照、空白对照、Carrier RNA。
适用范围:试剂盒用于定性检测手术切除的胶质瘤石蜡切片样本中MGMT(O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶)基因的甲基化状态。
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文献和实验LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
的定量。 更多有关特定CpG位点的甲基化的详细信息,可采用重亚硫酸氢盐修饰后测序分析。 LightCycler主要应用:实时荧光PCR技术进行快速准确的DNA甲基化分析 我们使用罗氏诊断公司的LightCycler®480高分辨熔解扩增试剂盒在LightCycler®480实时荧光PCR仪上,通过MS-HRM测定法对两种已知的经过启动子(FANCE和MGMT)甲基化的DNA修复基因的检测性能。 材料和方法 将多种细胞株的DNA样本作为检测模板。每μg的每种DNA样本都经过重亚硫酸盐修饰
基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组DNA的基因的重排,突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题,我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合,设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片,以期能快速、准确的对基因的重排,突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
信标探针(Molecular beacon TM) c) LightCycler TM杂交双探针 荧光标记探针的最大优点在于其特异性非常强,避免了非特异性扩增造成的假阳性信号。 匹基生物开发的荧光PCR检测试剂盒主要基于Taqman技术 (TaqmanTM 5-nuclease assay):除常规的一对引物以外,PCR反应体系中另加有一个能与PCR产物杂交的荧光双标记探针。该探针的5端标记一个荧光基团,3标记另一个荧光基团。此时5端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3’端荧光淬灭基团(发生
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