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上海羽朵生物
型号、规格:型号:5S-24T、4S-24T;规格:24人份/盒。
主要组成成分:由检测膜条(包被GAD、IA-2、IA、IC、ZnT8)、封闭剂、浓缩洗涤液、酶联物、TMB底物、终止液、孵育盘、判读卡、镊子、记录纸、双面胶纸和说明书组成。
适用范围:用于体外定性检测人血清中的IgG类抗谷氨酸脱羧酶抗体、抗蛋白酪氨酸磷酸酶抗体、抗胰岛素抗体、抗胰岛细胞抗体、抗锌转运蛋白8抗体。
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文献和实验细胞, 收集裂解液至离心管中,在振荡器上混匀4~15min,14000g离心15min(4℃),弃沉淀,用Bradford法或其它蛋白质测定方法测定上清中蛋白浓度以调整上样体积和上样量,进行 Western杂交时还需设置内或外参照,通常用beta-actin。 注意:一般上样20~30 μg已足够,如待检蛋白为低丰度蛋白,可加大上样量 至100μg,但电泳条带易拖尾,可制备亚细胞组份或采用更敏感的检测方法。 电泳分离(参照SDS-PAGE电泳方法) 转膜
制备蛋白提取物1. Prepare extracts from cultured cells or tissues with our Trident Extraction Kits.The total number of cells per ml and the cell equivalent loaded per lane of gel should be optimized specifically for each protein and antibody.2. Determine
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽
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