非标记磷酸化蛋白质组学定量（Pho-Label free）

蛋白质非标记定量技术（Label-free）是通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析，无需使用昂贵的稳定同位素标签做内部标准，只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据，比较不同样品中相应肽段的信号强度，从而对肽段对应的蛋白质进行相对定量。Label-free的技术优势就在于蛋白质不需要进行标记，所需样品总量少，耗费低。

技术原理

非标记定量蛋白质组学近年来成为重要的质谱定量方法，按照其原理分，主要有两种。其中spectrum counts类的非标记定量方法，发展比较早，也形成了多种算法进行定量，但是主要的原理都是根据MS2的鉴定结果作为定量的基础，各种方法的差别在于后期算 法在大规模数据上的修正。第二种非标记定量方法的原理是以MS1为基础，计算每个肽段信号在LC-MS质谱上的积分（峰面积）。

Label free流程图

技术优势

1.无需昂贵的同位素标签标记，实验耗费低，操作简单；

2.对样本的操作少，并且不受样本数目限制

3.可以检测到的肽段动态范围可以达到4个数量级以上，提高低丰度蛋白的检出率和非标定量的准确性；

4.可以检测不同组样本中有无差异的蛋白变化；

5.样本需求量少

应用范围

基础医学、临床诊断：生物标志物，疾病机理机制，疾病分型，个性化治疗等； 

生物医药：药物作用机理，药效评价，药物开发等；

微生物领域：致病机理，耐药机制，病原体-宿主相互作用研究等； 

海洋水产：渔业资源，海水养殖，渔业环境与水产品安全等；

食品营养：食品储藏及加工条件优化，食品组分及品质鉴定，功能性食品开发，食品安全监检测等。