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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
20
- 运输方式:
干冰运输
- 规格:
1×106 cells/细胞培养瓶
产品规格: 1×106 cells/细胞培养瓶
运输及保存条件
活细胞常温运输,接收后请立即放入细胞培养箱培养。冻存细胞干冰运输,接收后请放入液氮中保存,或立即复苏。
细胞特性
来源:流式筛选获得THP-1 CD34缺陷型。
形态:单核细胞样。
培养特性:悬浮生长。
支原体、细菌、真菌检测为阴性。
完全培养液主要成分
RPMI-1640 +10% fetal bovine serum + 0.05 mM 2-mercaptoethanol + 双抗。
THP-1 (CD34-)人单核细胞白血病细胞(CD34缺陷型)使用方法
细胞复苏
1.从液氮或干冰中取出冻存管迅速放入37℃水浴中,并不时摇动,在1分钟内使其完全融化。
2.吸出细胞,800 g/min离心5分钟,弃上清,加入适量完全培养液重悬细胞后接种于25 cm2培养瓶中,置37℃,5% CO2细胞培养箱中培养。
细胞传代
当细胞长到80%-90%融合时,轻轻吹打后吸出细胞,800 g/min离心5分钟,弃上清,加入适量完全培养液重悬细胞后按1:3比例接种于25 cm2培养瓶中,置37℃,5% CO2 细胞培养箱中培养。
细胞冻存
THP-1 (CD34-)人单核细胞白血病细胞(CD34缺陷型)当细胞生长状态良时,轻轻吹打后吸出细胞,800 g/min离心5分钟,弃上清,加入适量冻存液(90% fetal bovine serum + 10% DMSO)后重悬细胞。经逐步降温后转入液氮冻存。
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文献和实验血中的造血干细胞一般只出现一次高峰,其数量取决于供者血体积和 / 或单个核细胞的数量。由于外周血中造血干细胞含量很低,固常规中运用多极分离技术来收集这些细胞。在早期临床研究中,收集的干细胞作为移植物数量是否足够很不清楚。因为要检测这些细胞数量需要使用集落形成实验,但此法明显不适用于临床,因其大致需要 12-15 天时间出结果,故无法满足临床中当天出报告决定移植是否继续的要求。此问题自发现 CD34 抗体可鉴别造血干细胞,并成功地被运用流式细胞仪定量检测造血干细胞后被圆满解决了。 CD34+ 造血干细胞
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干/祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种FACS检测CD34+细胞方法的异同。1、材料与方法1.1 外周血造血干细胞 APBSC采集自经环磷酰胺(CTX)+重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员后的实体瘤患者(淋巴瘤、乳腺癌),采集使用CS3000
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