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- 上海羽朵生物
- YDS0606
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
200U
| 保存温度 | -20℃/-70℃ |
|---|
尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG酶）产品介绍尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG、UDG）来源于大肠杆菌重组克隆表达，分子量为25kDa，可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶。UNG酶对RNA无活性，主要应用于PCR扩增产物的防污染。
其作用原理基于：如果在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中，形成了含dU碱基的PCR扩增产物，该酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键，降解该PCR扩增产物。规格1U/μl储存缓冲液20mM Tris-HCl，150mM NaCl，1mM EDTA，1mMDTT，0.05% Tween20，50% glycerol，pH8.0。
试剂组成：
1、UNG 1U/μl
2、10×Reaction Buffer：200mM Tris-HCl(pH8.0，25℃)，100mM NaCl，10mM EDTA，1mg/ml BSA。活性定义37℃条件下，1小时降解1μg含dU碱基的单链DNA的酶量为1单位。保存条件每天或每周使用保存于-20℃。长期储存可保存于-70℃，但必须严格避免-70℃保存时的反复冻融。
质量控制：
1、SDS-PAGE电泳纯度大于98%；
2、降解活性、批间差异、稳定性；
3、1UUNG在37℃处理3分钟后，103拷贝以下含U模版应完全降解，不能产生扩增产物；
4、无外源核酸酶活性，无外源内切、外切核酸酶污染。
1、Incubate the product for 2 min at 50℃；
2、Inactivate UNG by heating to 95℃ for 5 min.
注意事项：
1、避免多次冻融，切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有极大影响。
2、UNG酶可以在PCR反应前清除不慎污染的含dUTP的PCR产物，从而避免由于污染导致的假阳性结果；
3、由于不同待扩增基因对dUTP的利用效率和对UNG酶的敏感度不同，因此，如果采用UNG体系导致检测灵敏度下降，应对反应体系进行调整优化；
4、扩增前后要使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换，PCR反应完成后切勿打开反应管。以最大限度的减少PCR产物对样品的污染。
备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
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文献和实验酶（如Msp I和Taq I等），可同时选择几种，以克服用一种酶只能识别特定序列的缺陷，室温作用1h 后加热灭活进行PCR； 3、紫外照射法：未加模板和Taq聚合酶的PCR混合液进行紫外照射，注意事项与方法同上述UV照射法； 4、g射线辐射法：1.5kGy的辐射可完全破坏0.1ng基因组DNA，2.0 kGy可破坏104拷贝的质粒分子，4.0 kGy仍不影响PCR，但高于此限度会使PCR扩增效率下降。引物可受照射而不影响PCR，g射线是通过水的离子化产生自由基来破坏DNA的。（三）尿嘧啶糖苷酶（UNG
」和「扩增区」分割开 PCR 体系配置和 PCR 扩增实验。如果不具备这样的条件，首先要避免荧光定量 PCR 实验结束之后开盖，以防扩增产物形成气溶胶对后续实验造成污染。少量意外开盖不能避免时，可以使用含有 UNG 酶（uracil-N-glycoslyase, 尿嘧啶 DNA 糖基化酶）的扩增预混液。如果在 PCR 反应中以 dUTP 代替 dTTP 参入到 PCR 产物中，形成了含有 dUTP 的扩增产物，UNG 酶能选择性断裂单链和双链 DNA 中 U 碱基的糖苷键， 降解 PCR 扩增
改造。 ung (Uracil DNA glycosylase) Map position: 56 min 功能：ung基因表达尿嘧啶-N-糖苷酶，这种酶能特异性识别DNA单链或双链上发生突变的尿嘧啶残基，并从DNA上水解去除尿嘧啶残基，防止DNA发生突变。ung基因的变异导致上述功能缺失， 有利用点突变。 uvrB (Ultraviolet) Map position: 18 min 功能：uvrB基因表达核酸外切酶中的b亚基，这种核酸外切酶具有DNA的切补功能，对紫外线损伤的DNA有修补作用
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