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- xuanke
- 国产/进口
- XK-YDXB-2772
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
38
- 细胞类型：
原代细胞
- 物种来源：
人/大鼠/小鼠/其他
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/淋巴
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
5ml-500ml
本公司生产的细胞总量约为5×10^5个/瓶，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
三．注意事项
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月；
2.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；
3.人肾癌成纤维细胞组织处理缓冲液只可用于科研。
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文献和实验细胞 MDA-MB-231 人乳腺癌细胞 MDA-MB-435 人乳腺癌高转移细胞 BCaP-37 人乳腺癌细胞 LCC1 人乳腺癌MX-1 人乳腺癌细胞 A2780 人卵巢癌细胞 OVCaR-3 人卵巢癌细胞 HO-8910 人卵巢癌细胞 HeLa 人宫颈癌细胞 泌尿系统肿瘤 PC-3 人前列腺癌细胞 PC-3M 人前列腺癌细胞 EJ 人膀胱癌细胞 Ketr-3 人肾癌细胞 神经系统肿瘤 TG-905 人脑
W． R． Earle（ 1943）从正常雄 C3H／ Am系小白鼠的皮下组织分离出来的连续继代培养的成纤维细胞系。开始是用含马血清 30％、鸡胚浸出液（ 1∶ 1） 20％、 Earle缓冲液 50％的培养液培养。不用胰蛋白酶处理，只用移液管即可分离出来，形成细胞悬浮液。因系 L实验组而命名，在 L之外无连续继代培养细胞系的报道。为最初现存的确立细胞株（ Esta· blished cell line），与人子宫癌海拉（ HeLa）细胞一起广泛应用于种种目的的实验。 L细胞
时间：60-90 min 转膜设备: 北京六一 半干转 建议：转膜缓冲液用新鲜配制的，可先配成2倍的母液，转膜液的多少会影响电转的效率，一般将吸水纸润湿即可，不要和膜一起浸泡，这样效果很好。 蛋白来源：人肝癌肿瘤细胞 蛋白名称（可保密）：notch 蛋白分子量：60-120 KDa WB用膜类型、孔径：pall NC膜 0.45 um 转膜方式（恒压、恒流）：恒流 0.3 A 转膜时间：-20度冰柜120 min 转
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
