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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 细胞类型:
原代细胞
- 物种来源:
人/大鼠/小鼠/其他
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/淋巴
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5ml-500ml
本公司生产的细胞总量约为5×10^5个/瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。


三.注意事项
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月;
2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;
3.人肾癌成纤维细胞组织处理缓冲液只可用于科研。
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文献和实验细胞 MDA-MB-231 人乳腺癌细胞 MDA-MB-435 人乳腺癌高转移细胞 BCaP-37 人乳腺癌细胞 LCC1 人乳腺癌MX-1 人乳腺癌细胞 A2780 人卵巢癌细胞 OVCaR-3 人卵巢癌细胞 HO-8910 人卵巢癌细胞 HeLa 人宫颈癌细胞 泌尿系统肿瘤 PC-3 人前列腺癌细胞 PC-3M 人前列腺癌细胞 EJ 人膀胱癌细胞 Ketr-3 人肾癌细胞 神经系统肿瘤 TG-905 人脑
普诺赛 hUC-MSCs原代分离与鉴定全流程详解(组织贴块法)
hUC-MSCs。 形态学判定 显微镜下观察,细胞通常呈成纤维细胞样、梭形或纺锤形,并可呈平行或旋涡状排列。 表面标志物流式鉴定 典型hUC-MSCs应高表达(阳性率≥95%)CD73、CD90、CD105等间充质干细胞阳性标志物,同时低表达或不表达(阳性率≤2%)CD34、CD45等造血干细胞及谱系标志物。 多向分化能力 在特定的诱导条件下,细胞应具备分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞的能力。 hUC-MSCs的原代分离并非简单的组织处理过程,从样本筛选、组织
W. R. Earle( 1943)从正常雄 C3H/ Am系小白鼠的皮下组织分离出来的连续继代培养的成纤维细胞系。开始是用含马血清 30%、鸡胚浸出液( 1∶ 1) 20%、 Earle缓冲液 50%的培养液培养。不用胰蛋白酶处理,只用移液管即可分离出来,形成细胞悬浮液。因系 L实验组而命名,在 L之外无连续继代培养细胞系的报道。为最初现存的确立细胞株( Esta· blished cell line),与人子宫癌海拉( HeLa)细胞一起广泛应用于种种目的的实验。 L细胞
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