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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 细胞类型:
原代细胞
- 物种来源:
人/大鼠/小鼠/其他
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/淋巴
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5ml-500ml
本公司生产的细胞总量约为5×10^5个/瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。


三.注意事项
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月;
2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;
3.PrimaCell™人乳腺成纤维细胞试剂盒只可用于科研。
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文献和实验的形态和生理特性。最后,与传统的2D细胞培养条件相比,这些水凝胶允许对细胞进行包封,以实现细胞在更贴近天然组织环境的3D环境中进行生长。 TRUEGEL3D™的功能和优点 TrueGel3D™适用于多种细胞系(MDCK、上皮细胞、成纤维细胞、癌细胞、原代细胞(包括淋巴细胞)、基质和胚胎心肌细胞)。 TrueGel3D™中形成水凝胶骨架的基本成分(葡聚糖、PVA、PEG)不会干扰细胞行为 凝胶透明,支持细胞成像分析 基于不同的凝胶速度,多种TrueGel3D™试剂盒可供选,可支持多种应用
孔培养体积缩小为 384 孔和 1536 孔形式的建议体积。由于接种体积和密度可能因细胞类型和下游应用而异,因此建议针对检测方案优化条件。 方法和材料 实验可以是贴壁生长癌细胞系的肿瘤干细胞,亦可是McCoy's 5a 培养基中培养的 T-29 人结肠癌细胞、F-12K (Kaighn's Mod.) 培养基中培养的 A549 人肺癌细胞,MCF7 人乳腺癌细胞。 另外,HTB-22™ 和 DU 145 人前列腺癌细胞均在杜氏改良 Eagle 培养基 (DMEM) 中培养。所有生长培养基均含有
之一,其制备方案需根据脑区、发育阶段和疾病模型进行精细化调整和优化。如对于胚胎或者新生脑组织,其髓鞘化低、ECM 松散以透明质酸为主,需要注重解离过程的温和处理。而成年神经组织因髓鞘致密,ECM 交联显著。必须采用更高强度、多酶联合且配合机械剪切和密度梯度去髓鞘的策略,以兼顾解离效率与细胞存活。 针对不同肿瘤类型,单细胞悬液制备需「因瘤施策」:血液瘤离心即可。实体瘤则先机械剪切,再以胶原酶、透明质酸酶和 DNA 酶破除致密细胞外基质,其中富含纤维和 ECM 胶原的胰腺癌或乳腺癌需更长酶解。对于常规
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