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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
61
- 细胞类型:
原代细胞
- 物种来源:
人/大鼠/小鼠/其他
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/淋巴
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5ml-500ml
本公司生产的细胞总量约为5×10^5个/瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。


三.注意事项
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月;
2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;
3.人胚胎绒毛膜细胞只可用于科研。
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文献和实验佚名 绒毛膜癌(choriocarcinoma)简称绒癌,是滋养层细胞的高度恶性肿瘤。约50%继发于葡萄胎,25%继发于自然流产,20%以上发生于正常妊娠,5%以下发生于早产或异位妊娠等。主要临床表现是在葡萄胎、 流产 或足月产后阴道持续不规则流血,血及尿中HCG浓度显著升高。 病变 肉眼观,子宫
最初,用0.25%胰酶消化液传代,细胞脱壁容易,但是,吹打细胞180次左右,也只有80%细胞是单个细胞,而且,易引起细胞机械性损伤。于是,我改进方法。 现在,我的处理如下: 弃旧培养液 0.02%EDTA作用2分钟 弃EDTA 0.1%胰酶作用30秒 弃胰酶,继续消化2分钟 加培养液终止消化。一般吹打细胞30-40次,细胞基本为单个。 EDTA是一种化学螯合剂,主要作用主任已说。我要提醒一下:EDTA作用不受血清抑制,故消化后需彻底清除,否则影响细胞生长。 建议:可能的话离心
Nature: 全球首个!单细胞测序绘制人胚胎造血和免疫系统发育图谱
在人类胚胎早期发育中,造血首先发生在卵黄囊(着床后的 2 - 3 周);之后,在胚胎内的 aorta-gonad-mesonephros (AGM) 区产生造血祖细胞;然后,卵黄囊和 AGM 区的祖细胞在肝脏等胎儿组织器官中定植,直到妊娠中期,肝脏仍是造血的主要器官。尽管造血发育在脊椎动物中存在保守性,但老鼠和人类之间还是存在明显的区别。因此,通过对人体早期胚胎组织进行全面的研究,可以解析早期造血的分子和细胞结构,为了解免疫缺陷、儿童白血病和贫血症提供了基础数据,并可加深对 HSC/MPP
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