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Easyinno 创新实验室 创新一点点 实验易趣多
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文献和实验分选,即将目的细胞亚群直接从细胞悬液中分离出来。通过磁珠包被目的细胞的特异性抗体与混合细胞悬液孵育,在抗原抗体发生特异性结合后,通过磁分离方式,将目的细胞分离出来。 阴性分选,即从多细胞悬液中分离去除非目的细胞而得到目的细胞的一种方法。此方法的优点在于整个分选过程中目的细胞都未与磁珠结合。由于抗原抗体的结合可能会引起细胞膜表面的信号传递,因此,此法具有较大的优势。但同时此方法也有不足之处,当靶细胞的细胞数所占细胞比例较小时,分选过程中存在的非特异性吸附会直接导致目的细胞的损失,此外,非目的细胞未
准备吧。磁力架这个东西其实很简单,如果有钱的话建议直接买 CoIP 试剂盒,一般是会送磁力架的,如果没钱那就 DIY 一个吧。先从网上下载一个磁力架的 3D 文件,送某宝 3D 打印出来,再买点小磁铁装进去就 ok 了,下图是效果图。然后从实验室找到一个老式的 DNA 混合仪,用热熔胶粘一块浮漂板上去,这样 EP 管混合器就搞定了。至于磁珠,因为周围的代理商很少卖这个东西,都不甚了解,于是去丁香通看看,搜索「IP 磁珠」,正好看见第一个是金牌供应商,点击一下联系厂家,不久厂家来电,先不着急下单
天,吸除去抗体,每孔加入400 μl RPMI-1640培养基,不要让板干燥。2. 杀死小鼠并将CD4+CD44loCD62Lhi幼稚T细胞分类。3. 24孔板PRMI-1640培养基中每孔播撒5×106细胞,培养细胞过夜。 4. 按1:2比例分配细胞(把一个孔的细胞分成两孔),加入IL-2至终浓度50 U/ml,培养6 h(37°C,5%CO2)。5. 1 200RPM旋转板5 min(室温),吸除培养基,并加入1 ml 含有适量MSCV颗粒的RPMI-1640(病毒浓度取决于多于
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