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- 百奥莱博
- GS0030-AOI
- 北京
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
469
- 英文名：
AMV Reverse Transcriptase
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
200U
特别提示：包括AMV逆转录酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：AMV逆转录酶
英文名称：AMV Reverse Transcriptase
产品货号：GS0030
产品规格：200U
储存条件：冷冻（-20℃）
概述
AMV Reverse Transcriptase（RT）是由大肠杆菌表达的重组禽类成髓细胞瘤逆转录酶。AMV RT是一个异源二聚体，由两个不同的亚基组成（alpha和beta亚基）。AMV RT具有多种活性，包括RNA和DNA依赖的DNA polymerase活性、DNA-RNA解旋活性、序列特异的Mn2+依赖性内切核酸酶活性和RNase H(45~60℃)内保持活性，因此可逆转录含有大量二级结构的RNA。
特点
- 优化活性温度范围45~50℃热稳定性高，逆转录温度可达60℃高效合成长达13 kb的第一链cDNA合成掺入修饰的核苷酸
应用
第一链cDNA合成，用于RT-PCR和实时RT-PCR;可提高反应温度降低二级结构对逆转录的影响;合成cDNA，用于克隆和表达研究;合成标记的cDNA探针;引物延伸法分析RNA
组份
AMV RT及5X AMV RT Buffer
技术规格
| 浓度 | 10U/μl |
| 储存条件 | -20℃ 24个月 |
| 5X AMV RT缓冲液 | 50mMTris-HCl(pH 8.3)，40 mM KCl， 8.75 mM MgCl2，10 mM DTT，0.1mg/ml乙 酰化的BSA，1 mM放射性标记的dTTP以 及0.25 mM poly(A)：oligo(dT)。 |
| 保存液 | 200 mM磷酸钾，2 mM DTT，0.2%(V/V) Triton X-100和50%(V/V)甘油（pH 7.2） |
| 单位定义 | 一个活性单位是指在37℃、10分钟内 催化将1nmol脱氧核苷酸转移到酸沉淀物 质中所需的酶量。 |
| 抑制剂 | 金属螯合剂和无机磷酸盐。焦磷酸 钠可降低AMV RT活性，但是当其浓度≤4 mM时可增加全长cDNA的产量 |
| 失活 | 85℃加热5分钟 |
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酸，而 AMV 逆转录酶表现出更高的错误率。 逆转录酶可展现出末端核苷酸转移酶（TdT）活性， 对于 RNA 测序（RNA-Seq），TdT 活性可以诱导逆转录酶特异性地向 cDNA3′ 末端加入一系列 Cs。在高浓度镁和/或锰离子条件下的 cDNA 合成期间及合成后阶段，这种类型的 TdT 活性会被触发。结合特殊设计的具有 3’Gs（称为模板切换寡核苷酸）的 DNA 寡核苷酸，TdT 活性可以特异性地修饰 3’cDNA 末端和 5′ RNA 末端。这些序列修饰的实例包括引入用于随后 cDNA 合成
，在缓冲液和还原剂（如DTT）存在的条件下加入，因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性，从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNase A，B，C对RNA的降解，并不能防止皮肤上的RNase，因此尽管使用了这些抑制剂，也要小心不要从手指上引入RNase。 使用无RNaseH活性（RNaseH-）的逆转录酶 逆转录酶催化RNA转化成cDNA。不管是M-MLV还是AMV，在本身的聚合酶活性之外，都具有内源RNaseH活性。RNaseH活性同聚
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