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HNE1-DDP

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  • ATCC/DSMZ/CCTCC/promocell/ExPASy/ JCRB/cellbiologics/KCLB/国家细胞资源中心
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  • A167
  • 2025年09月18日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 英文名

      HNE1-DDP

    • 库存

      5166

    • 细胞类型

      详询

    • 品系

      详询

    • 组织来源

      器官

    • 相关疾病

      详询

    • 物种来源

      人\动物

    • 免疫类型

      详询

    • 细胞形态

      上皮样

    • 器官来源

      小鼠

    • 运输方式

      干冰

    • 年限

      永久

    • 生长状态

      良好

    • 规格

      T25/冻存

    细胞系使用说明书
    细胞名称 HNE1-DDP 人鼻咽癌细胞顺铂耐药株
    货号 A010
    种属
    细胞来源 ATCC/中科院/协和医院等地引进
    生长特性 贴壁  上皮样
    培养条件 培养基: 90% RPMI-1640 +10% FBS +2μM DDP (推荐HAKATA优等胎牛血清,货号:HN-FBS-50)
    温度:37℃     气相:95%空气,5% CO2
    传代
    1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
    2.待细胞长至80-90%时,需要对其进行传代,推荐传代比例为1:3至1:5;
    3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心5min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
    保存 冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO
    (备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)
    保存条件:液氮存储
    供应限制 仅供研究之用
    常见问题及解决方案 1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
    2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 24 小时)
    3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

     

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