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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SK-BR-3
- 库存:
5098
- 细胞类型:
详询
- 品系:
详询
- 组织来源:
器官
- 相关疾病:
详询
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
详询
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 器官来源:
人
- 运输方式:
干冰
- 年限:
永久
- 生长状态:
良好
- 规格:
T25/冻存
细胞系使用说明书
| 细胞名称 |
SK-BR-3 人乳腺癌细胞 |
| 货号 |
H099 |
| 种属 |
人 |
| 细胞来源 |
ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
| 生长特性 |
贴壁 上皮细胞样 |
| 培养条件 |
培养基:DMEM90%+ FBS 10%(推荐HAKATA优等胎牛血清,货号:HN-FBS-50) 温度:37℃ 气相:95%空气,5% CO2 |
| 传代 |
1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将旧培养基更换成5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液或传代,每2至3天加入新鲜培养基(根据细胞密度); 2. 通过添加新鲜培养基来维持培养。或者可以通过离心去除旧培养基,再加入新培养基并以5-10×105个活细胞/mL的密度再悬浮进行培养。建议将细胞密度维持在5×105个至1×106个细胞/mL之间。
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| 保存 |
冻存条件:70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO (备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。) 保存条件:液氮存储 |
| 供应限制 |
仅供研究之用 |
| 常见问题及解决方案 |
1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时) 3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。 |
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文献和实验刚开始养SK-BR-3时,细胞状态不是很好,贴壁也不均匀,于是开始想办法,考虑是不是吹打的不够,或是传得过多,或是其它的什么,后来发现的确如此,细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。我的传代方法是:以50平方厘米培养瓶为例,待细胞长满瓶底70%-80%1 、吸除或倒掉瓶内旧培养基。2 、PBS 5ml加入培养瓶,轻轻晃动培养瓶,让PBS流遍细胞表面,倒掉。3 、PBS 5ml加入培养瓶重复洗一次,倒掉。4 、加入1ml胰蛋白酶消化液,轻轻摇动培养瓶,使消化液流遍所有细胞表面,然后置37度
1.乳腺单纯癌:由管内癌发展而来,为乳腺癌最常涂片所见:癌细胞巨大,多为裸核;核仁多且巨大,畸形大多染成深蓝色,细胞大小,形态染色均不一致。 2.乳腺腺癌:癌细胞呈典型的腺体样排列。细胞呈锥形,核位于细胞一侧,呈扭曲、折叠、凹陷等畸形改变,核煺我增多,粗颗粒状,分布不均;核仁多而形态不规则,胞质丰富,略嗜碱性,胞质及核内可见多量弥散的小空泡。 3.乳腺髓样癌:此型细胞成分极丰富与单纯癌一起称为实体癌,医学教|育网搜集整理癌细胞一般中等大小,圆形、胞质中等量。核染色质致密,网状。核仁
我养的细胞都是乳腺癌细胞,以下几种:1、MCF-7 是一种很好养的人乳腺癌细胞,培养基用DMEM或RPMI1640均可, 10-15%的小牛血清就能长得很好。一般两到三天传一代。传代也很常规。吸出培养基,加入0.25%的胰酶1ml,轻轻晃动培养瓶,使胰酶流遍瓶壁,以去除残余的培养基。再加入2ml胰酶(25ml培养瓶)静置消化2-5min,待细胞缩起变圆,将胰酶吸出加入培养基3ml吹打成单细胞悬液分瓶即可。我一般都不用缓冲液冲洗,而直接用胰酶冲洗一下以去除剩余血清的作用,感觉效果还不错
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