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- CQH068
- 2025年10月26日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
hs578.t
- 库存：
5067
- 供应商：
蒂科生物
- 肿瘤类型：
0
- 细胞类型：
详询
- 品系：
详询
- 组织来源：
器官
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
详询
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
详询
- 器官来源：
人
- 运输方式：
干冰
- 年限：
永久
- 生长状态：
良好
- 规格：
T25
细胞系使用说明书
| 细胞名称 |
hs578.t 人乳腺癌细胞 |
| 货号 |
H068 |
| 种属 |
人 |
| 细胞来源 |
从ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
| 生长特性 |
贴壁 上皮样 |
| 培养条件 |
培养基：90%DMEM+10%FBS+10μg/ml 重组人胰岛素 温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳 |
| 传代 |
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液； 2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6； 3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。 |
| 保存 |
冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO (备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：液氮存储 |
| 供应限制 |
经供研究之用 |
| 常见问题及解决方案 |
1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时） 3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。 |
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文献和实验LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
”和“HRM基因扫描”软件模块分析的数据。（b）含100％甲基化和非甲基化质控品和50％、25％、10％、5％和1％的甲基化标准品的MGMT MS-HRM测定法。使用“Tm Calling”和“HRM基因扫描”软件模块分析的数据。 图2：（a）FANCF MS-HRM测定，显示稀释卵巢癌细胞株2008中存在DNA甲基化。（b）MGMT MS-HRM测定，显示乳腺癌细胞株MDA-MB435和HS578T中存在甲基化。 结果和讨论 针对两个基因的MS-HRM测定法都可检出非甲基化DNA背景下1％的甲基
。4. 比色：选择 490 nm 波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果。个人心得体会1. 细胞消化、接种数量：注意消化和数量，消化和数量，消化和数量（重要的事情说三遍）。从我个人的实验经验来看，这是重中之重。若消化出现问题，则会影响细胞的活性，进而影响 OD 值。对于 MDA-MB-231、MCF-7、HS-578T 等一系列容易消化的细胞，消化时胰蛋白酶中不添加 EDTA，消化时也仅需胰酶浸润数秒即可。然而，对于 SW480 等一系列难以消化的细胞，胰蛋白酶中需添加浓度为 0.25
，并通过释放IL3和GM-CSF刺激产生Mφ。最后，Thl一起释放的IFN-γ和TNF-α激活MQ，再通过hs配体的表达杀伤M中和其他敏感细胞。 皮肤接触性超敏反应所出现的应答格局高度相似。因抗原加工途径的不同，C134T细胞或CD8T细胞皆可参与。典型抗原为高反应性的小分子，后者可与自身抗原反应并形成蛋白-半抗原复合物即半抗原-肽复合物，并通过结合MHC分子而被T细胞作为外来抗原所识别。 接触型超敏反应主要分两个时相：致敏相和发生相。致敏相中，表皮中的朗格汉斯细
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