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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pDONR223-CD73
- 库存:
100
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pDONR223-CD73/ pDONR223-CD73质粒
pDONR223-CD73 Plasmid
Catalog No. PVTB00480-1
Vector Backbone pDONR223
Backbone manufacturer Invitrogen
Vector type Gateway entry vector
Backbone size w/o insert 5005bp
Cloning site 5 N/A
Site destroyed during cloning N/A
Cloning site 3 N/A
Bacterial resistance Spectinomycin
Growth strain DH5alpha
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers None
Background Full length cDNA clone of Homo sapiens 5'-nucleotidase ecto
Gene Information
Alternative Gene Name NT5E; NT; eN; NT5; NTE; eNT; E5NT; CALJA
Insert Gene name CD73
Insert size 1725bp
Accessions BC065937
Tag None
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 4907
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文献和实验库。 克隆资源因为已克隆到Gateway改造过的载体,所以可以快速地将基因转到各种表达系统中。 图4 进入Gateway系统的各种路线 * 目前的克隆资源带有attB位点,需要与pDONR质粒重组五、触手可及的最高级表达系统 一旦您构建好Gateway入门克隆,蛋白表达和分析的大门就会向您敞开。使用Gateway技术,您可以进入到几乎是无数种的表达系统。因为没有一个单一的表达系统蛋白适合于每一种蛋白,优化基因表达的最好方法是在多个系统中分析您的蛋白(图5)。 图5 在Gateway
是线性的,如果用质粒必须做酶切,但是事实证明用超螺旋的质粒结果没有区别。5. 同理,用引物在目的基因上下游加入AttL序列后直接进行LR反应也是可行的,可以省去BP反应相关的材料和费用。但是pDONR系列载体自有其优点(载体小,拷贝数高,卡那霉素抗性,容易测序),所以要按实际情况权衡6. 慢病毒载体的空白质粒有大量的重复序列,久存会导致LR反应成功但是转化后抽不出质粒的情况,需要注意。
也夹着一个ccdB自杀基因。当需要将目的基因从入门载体(Entry Vector)转移到目的载体(Destination Vector)时,只要将两种质粒混合(线性化能有效提高重组率),加入含有Int、IHF、Xis等重组因子的LR重组酶混合物,attR2序列和attL2序列发生重组,生成一个融合质粒。attL1序列再和attR1序列重组,融合质粒分解为两个新的质粒,目的基因与原来位于目的载体上的自杀基因发生重组置换,得到一个带目的基因的目的载体(生成新的重组位点attB1、B2)和带自杀
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