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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pGL4.10-WNT10B promoter
- 库存:
100
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pGL4.10-WNT10B promoter Plasmid
Catalog No. PVTB00939-2a
Vector Backbone pGL4.10
Backbone manufacturer Promega
Vector type Luciferase reporter vector
Backbone size w/o insert 4242bp
Cloning site 5 Kpn I
Site destroyed during cloning NO
Cloning site 3 Hind III
Bacterial resistance Ampicillin
Growth strain Top10
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers None
Background Mammalian Luciferase Reporter vector of Homo sapiens Wnt family member 10B promoter
Gene Information
Alternative Gene Name SHFM6; STHAG8; WNT-12
Insert Gene name WNT10B promoter
Insert size 2000bp
Accessions NM_003394
Tag None
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 7480
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文献和实验DNA模板上专一地与 RNA聚合酶结合并决定转录从何处起始的部位,也决定基因的转录效率。生物中有许多启动子,如大肠杆菌约有 2000个启动子。各启动子的效率可不相同,大肠杆菌的强启动子每 2秒钟启动一次转录,而弱启动子每 10分钟才启动一次,从百多个大肠杆菌启动子结构的分析,得知两个强启动子的同源序列的中心在转录起始部位(基因编码链上第一个核苷酸) 5'侧约 10和 35个核苷酸处,弱启动子序列中往往有多处核苷酸被置换。许多原核生物都含有这两个重要的启动
1、质粒的概念 质粒(Plasmid)是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子,能够独立于宿主染色体进行自我复制,并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因(如抗生素抗性基因)。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型,如用于保存序列信息的克隆质粒(如:pUC 系列质粒),用于表达蛋白的质粒(如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒),用于基因编辑的质粒(如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
系列):高拷贝会导致大片段质粒复制压力大,易丢失或断裂,优先用低拷贝载体(如 pACYC184,拷贝数 10-15)或大片段专用载体(如 BAC 载体 pBeloBAC11,可容纳 100kb 以上片段,在大肠杆菌中稳定存在); ④选择合适的连接方法,比如 Gibson 组装(无缝克隆)的方法更适合 10-20kb 大片段的连接,相比传统的 T4 连接的方法,成功率更高,操作更简便; ⑤选择重组缺陷型感受态,提高大质粒的转化效率,如 Stbl3、DH10B 等,此外转化方式也会影响转化
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