- ￥1230
- LSM Bio
- 进口
- PVTB00267-2a
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20摄氏度
- 保质期：
3个月
- 英文名：
FUW-tetO-CR
- 库存：
100
- 供应商：
LSMBIO
- 规格：
2ug
FUW-tetO-CR Plasmid
Catalog No. PVTB00267-2a
Vector Backbone FUW-tetO
Backbone manufacturer Addgene
Vector type Mammalian Expression, Lentiviral
Backbone size w/o insert 8382bp
Cloning site 5 EcoR I
Site destroyed during cloning NO
Cloning site 3 EcoR I
Bacterial resistance Ampicillin
Growth strain Stbl3
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers Zeocin
Background Lentiviral expression of Homo sapiens teratocarcinoma-derived growth factor 1
Gene Information
Alternative Gene Name TDGF1; CRGF; CRIPTO
Insert Gene name CR
Insert size 519bp
Accessions NM_001174136.1
Tag None
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 6997
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文献和实验一、试剂准备 1、Cas9 过表达慢病毒载体选择。 货号 名称 CR2001 pLV-Cas9-Puro CR2002 pLV-Cas9-Neo CR2003 pLV-Cas9Nick-Puro CR2004
2NA 合成方法，成功地抑制了靶基因在哺乳动物细胞中的表达。他们设计构建了两个U6 启动子分别引导19nt 的siRNA 的正义链和反义链的合成，两段RNA 在细胞内退火连接成为双链RNA。Sui 等也构建了U6 启动子控制的siRNA 表达质粒，不同的是siRNA 模板为回文结构。在U6 启动子下游依次是siRNA 21nt 编码序列、6nt 的间隔序列、反向的siRNA21nt 编码序列及由5 个T 寡核苷酸尾组成的转录终止序列。这个质粒诱导合成的RNA 为发夹样双链结构。发夹样双链结构的RNA
2. 提取质粒的时候，最后一步的酒精挥发很关键，基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间，最好是空调吹热风，或是37度温箱放长一点的时间，我试过室温过夜，酶切很好。 3. 做WESTERN BLOT 的时候，大家往往会摸索一抗、二抗的浓度，封闭时间，曝光时间等等，而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜，甚至重新提蛋白，这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后，将PVDF膜晾干，裁减成小块，保存起来，用的时候取出一块，没有任何影响
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